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PCR片段可直接用于细菌的基因敲除吗?
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实验室小白
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专业: 微生物学
[交流]
PCR片段可直接用于细菌的基因敲除吗?
已有8人参与
请教大家,做细菌的基因敲除,可不可以用上游同源臂+抗性基因+下游同源臂用 overlap PCR之后直接把PCR片段转入细菌,就不重构质粒了,这样可行吗?先谢过各位大神了!
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注册: 2013-02-07
专业: 元素化学
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2019-02-01 19:26:43
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shuqi123
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注册: 2019-01-14
专业: 病原细菌、细菌感染与宿主
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
这个你不需要重构吗?另外你的序列值对吗 方法么有试过
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实验室小玩家 MY QQ 3150890351
2楼
2019-02-01 15:13:30
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mengqiang327
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注册: 2015-07-29
性别: GG
专业: 生物物理、生物化学与分子
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小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流
2019-02-13 20:34:54
理论上是可以的,但重组效率估计会很低。如果你的宿主菌自身有较强的重组酶或者重组系统,可以试试。
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胸膛走在思想前面的烟酒僧
3楼
2019-02-01 16:48:35
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sxjcas
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2019-02-01 23:32:41
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