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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » PCR片段可直接用于细菌的基因敲除吗？
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实验室小白

新虫 (正式写手)

[交流] PCR片段可直接用于细菌的基因敲除吗？ 已有8人参与

请教大家，做细菌的基因敲除，可不可以用上游同源臂+抗性基因+下游同源臂用 overlap PCR之后直接把PCR片段转入细菌，就不重构质粒了，这样可行吗？先谢过各位大神了！

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1楼 2019-01-31 15:29:15
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shuqi123

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这个你不需要重构吗？另外你的序列值对吗 方法么有试过
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实验室小玩家 MY QQ 3150890351
2楼2019-02-01 15:13:30
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mengqiang327

银虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-02-13 20:34:54
理论上是可以的，但重组效率估计会很低。如果你的宿主菌自身有较强的重组酶或者重组系统，可以试试。

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胸膛走在思想前面的烟酒僧
3楼2019-02-01 16:48:35
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)
可以的

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4楼2019-02-01 19:26:43
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sxjcas

禁虫 (知名作家)
本帖内容被屏蔽
5楼2019-02-01 23:32:41
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Holly299

新虫 (小有名气)
PCR-targeting

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6楼2019-03-10 10:11:33
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默默是我

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
可以的，我看过很多类似的文章都是这样做的

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7楼2019-09-09 17:02:45
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匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
8楼2019-09-28 06:58:57
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shipeng001

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by mengqiang327 at 2019-02-01 16:48:35
理论上是可以的，但重组效率估计会很低。如果你的宿主菌自身有较强的重组酶或者重组系统，可以试试。

正解

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9楼2020-10-02 22:59:20
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