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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 【求助】紫外可见分光光度的若干问题
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深水鱼216

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】紫外可见分光光度的若干问题

以前没做过紫外可见分光光度的实验，理论和经验都没有。最近做了一下，发现诸多问题：
1  为什么会出现负的吸光度呢？基线调节时没问题啊。
2  同一种溶液，同样的比色皿，不一样的体积，但均达到了测量所需的最少体积，测得的吸光度有很大差别，为什么？
3  同一种溶液，不同的比色皿，为普通的透光宽度1cm 的和微量的透光宽度为1mm （光程均为1cm ）的比色皿，测得的吸光度差别很大，为什么？

理论上讲不应该出现上述问题，但是实际我测了好多遍还是上述现象，恳请各位大侠讨论帮忙啊。谢谢啦！
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1楼 2009-05-06 20:42:48
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davis_0411

木虫 (正式写手)
★
opq691(金币+1):感谢应助，欢迎常来分析版
1、出现负值，是空白吸收比样品吸收要强。
3、光程不一样，透光率自然不一样。
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4楼2009-05-14 10:45:35
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zzycyy

木虫 (著名写手)
★
深水鱼216(金币+1,VIP+0):谢谢啦！我再仔细做一下。 5-7 11:50
如果空白吸收很大，又可能，还有可能双光束比色杯对放反
是否充分摇匀，有没有悬浮物，如果峰位没变，把液体加到80％以上再试试
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2楼2009-05-07 09:03:47
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kmd2005

木虫 (著名写手)

杀虫刹
★ ★
opq691(金币+2):很详细，感谢应助，欢迎常来分析版
1）参比比试样的吸收还强就会出现负值，但只要工作曲线好，不影响测试；
2）液量越少对测试准确度影响越大，包括对比色皿的洗涤不充分等因素，可以产生这种现象；
3）这个很正常，透光率明显不同，吸光度肯定不同，因为吸光度本身就是透光率的负对数关系。
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天很蓝``
3楼2009-05-07 20:21:23
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