| 查看: 3134 | 回复: 18 | |||
[交流]
对羟基联苯比色法测乳酸含量的原理
|
|||
|
乳酸含量的测定，除高效液相、气相和离子色谱外，还有一种较为为常用且精确度很好的方法就是对羟基联苯比色法。由于实验室条件和样品量的关系，我最终确定用对羟基联苯比色法测乳酸。但是在整理具体分析方法的时候发现，不同文献中，所述实验原理和分析步骤有较大差别。现具体叙述，想和大家交流一下。 各文献所述 基本原理是：乳酸与浓硫酸共热被氧化为乙醛，然后乙醛与对羟基联苯发生显色反应，所呈颜色在w波长（565 nm，570 nm均有出现）下具有特征吸收峰，在一定范围内，乳酸含量与该峰处的吸光度呈线性关系。 但是反应期间有铜离子的催化作用，二其催化作用发挥在那个阶段，不同文献的表述不一。大部分中文文献中：乳酸在铜离子的催化下，与浓硫酸作用生成乙醛，乙醛能与对羟基联苯作用生成在w波长 处有特征吸收的紫色物质；在一定浓度范围内，乳酸含量与w波长 处吸光度呈线性关系，因此可以通过测定w波长 处的吸光度来测定乳酸的含量。而在外文文献中，铜离子发挥催化作用是在乙醛与对羟基联苯间显色反应阶段（两篇：[1] barker s b, summerson w h. the colorimetric determination of lactic acid in biological material[j]. journal of biological chemistry, 1941, 138(2): 535-554.；[2] barnett a j. the colorimetric determination of lactic acid in silage[j]. biochemical journal, 1951, 49(4): 527-529.）。 另外，对于铜离子添加的时间：一种是在前面：加待测液后，加入4%（w/v）硫酸铜溶液，再加浓硫酸，再加对羟基联苯试剂进行显色；一种是在后面：加待测液，之后加浓硫酸，之后加4%（w/v）硫酸铜溶液，再加对羟基联苯试剂进行显色。到底哪个阶段前加铜离子，是在氧化乳酸成乙醛阶段前添加，还是氧化阶段后乙醛与对羟基联苯显色阶段前添加，还是只要在乙醛与对羟基联苯显色阶段前添加便可？ 所以，这里的问题就是：(1)铜离子发挥催化作用的阶段，是催化乳酸与浓硫酸反应生成乙醛，还是催化乙醛与对羟基联苯显色反应，还是对两种反应均有催化作用；(2)硫酸铜溶液添加时间，是在加入待测液之后便添加硫酸铜溶液，还是在乳酸与浓硫酸反应之后且加对羟基联苯显色之前添加。 欢迎大家参与讨论，提出宝贵建议。 谢谢。 |
回复此楼» 猜你喜欢
面上提前没消息，有中的吗
已经有14人回复
-
这种情况还有戏吗
已经有12人回复
-
微信指数没变化，科研之友没阅读
已经有19人回复
-
准备明年的基金了
已经有7人回复
-
面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！
已经有24人回复
-
2026年国自然面上资助率
已经有21人回复
-
基础研究怎么拉横向，学校到款任务越来越多，难以完成 拉横向，都有哪些途径啊
已经有10人回复
-
2027年申博
已经有3人回复
-
一个有机合成实验室都需要哪些设备？
已经有7人回复
-
HXDI做水性聚氨酯乳液，是不是特别容易出渣
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
助理研究员——吉林大学-苏州国家实验室光电半导体智能设计与应用团队
+1/476
-
南京大学医工交叉方向招聘脂质纳米材料与RNA递送方向博士后1-2名
+1/85
-
采用本质安全型氢气流量控制的化学合成 - Alicat ISMC本安防爆质量流量控制器
+2/78
-
Postdoctoral fellow in Medicinal Chemistry, McGill University
+1/71
-
祈福面上好运，散金币
+1/44
-
有机合成高级研究员
+1/31
-
坐标南京
+1/30
-
中国特种设备检测研究院招聘1名高温涂层方向博士后
+2/30
-
大连理工大学化学学院界面介导黏附与组装课题组招收推免生
+1/27
-
北理工集成电路杰青团队 | 诚招科助理
+1/10
-
北京理工大学-集成电路与电子学院杰青团队-招博士后
+1/9
-
北京师范大学（珠海校区）赵亚然副教授招收2027年电催化推免硕士/博士研究生
+1/6
-
西湖大学拓扑光学、非厄米光学、太赫兹方向博士后招聘（长期有效）
+5/5
-
多本Scopus收录国际英文期刊征稿，全免 APC！含医学期刊
+1/5
-
国家自然科学基金申报者发榜前心理状态调查，麻烦帮忙填一下哇！
+1/5
-
浙江大学医学院附属妇产科医院张霈婧课题组招科研助理——生物信息方向
+2/4
-
北京师范大学（珠海校区）赵亚然副教授招收2027年电催化硕士/博士研究生
+1/3
-
国自然发榜在即：此刻的你，是什么心情？
+1/2
-
浙江大学王宇课题组诚聘博士后/博士研究生/科研助理（招聘长期有效）
+1/1
-
这些Scopus收录的英文国际期刊正在征稿（快速审稿）2026年底前免APC！
+1/1
3楼2019-01-25 14:42:08
8楼2019-01-25 17:18:36
9楼2019-01-25 17:19:54
10楼2019-01-25 17:20:09
11楼2019-01-25 17:20:20
12楼2019-01-25 17:20:33
18楼2019-08-02 13:47:24
19楼2019-08-02 13:47:36
简单回复
2019-01-25 13:42
回复
食品灬戴子龙(金币+1): 谢谢参与
nono20094楼
2019-01-25 14:43
回复
食品灬戴子龙(金币+1): 谢谢参与
·
Biotage5楼
2019-01-25 15:34
回复
食品灬戴子龙(金币+1): 谢谢参与
2019-01-25 15:47
回复
食品灬戴子龙(金币+1): 谢谢参与
youngen7楼
2019-01-25 15:58
回复
食品灬戴子龙(金币+1): 谢谢参与
tzynew13楼
2019-01-26 20:54
回复
食品灬戴子龙(金币+1): 谢谢参与
miaojiabing14楼
2019-01-28 08:35
回复
食品灬戴子龙(金币+1): 谢谢参与
youngen15楼
2019-01-28 12:49
回复
miaojiabing16楼
2019-01-30 08:04
回复
youngen17楼
2019-01-31 08:44
回复