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humants

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助】透析袋预处理

我打算做蛋白的透析复性,透析袋买来了,但是不知道怎么做预处理在网上搜了预处理的步骤,但是有几点不明白。我搜索的步骤如下:
   1. 把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段,注意带手套。
   2. 在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟。
   3. 用蒸馏水彻底清洗透析袋。
   4. 放在1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟。
   5. 冷却后,存放于4度,必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是     必须戴手套。
   6. 用前在透析袋内装满水然后排出,将之清洗干净。


我有以下几点不明白:
1.步骤一中,为什么要戴手套操作?
2.步骤二中,用“大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)煮沸”,是分别煮沸、还是两种溶液混到一块煮沸?
3.步骤四中,“透析袋必须浸没在溶液中”此处的溶液是指什么?1mmol/L EDTA(pH 8.0)?

麻烦大家了,我是新手不大懂,还请见谅,呵呵
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yang0071

木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★
humants(金币+4,VIP+0):谢谢你。。你也是这么做的吗? 5-6 14:33
第一点  ls说了
第2点  配一个溶液,含2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)
第3点  2%(W/V)碳酸氢钠和1mmol/L EDTA(pH 8.0)
3楼2009-05-06 12:14:30
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112976553

金虫 (小有名气)

★ ★ ★
humants(金币+3,VIP+0):谢谢。。步骤不是我写的,是在网上搜的呵呵 5-6 14:28
透析袋实验以前也做过一点,但很久不碰忘得差不多了。
戴手套无非是防止污染透析袋。透析袋上面有小孔,手上的油脂容易堵塞沾染上去。
你写了第二步骤 又写了第四步骤,咋感觉重复咧?
2楼2009-05-06 10:01:09
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bbyu007

木虫 (正式写手)


humants(金币+1,VIP+0):谢谢你的参与,但请看清主题,不要应付我 5-6 14:30
(1)将透析管剪成适当长度,10-20cm的小段,即形成透析袋
(2)在大体积2%(m/V)碳酸氢钠和1mmol/LEDTA(PH*8.0)中将透析袋煮沸10min
(3)将透析袋用蒸馏水彻底漂洗
(4)将透析袋置1mmol/L EDTA(PH*8.0)中煮沸10min
(5)将透析袋冷却,存放于4摄氏度,应确保透析袋始终浸没在液体中。
重要:从此步起用透析袋时一定要带手套操作
(6)在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗。
我是笨笨鱼~~~
4楼2009-05-06 12:14:39
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youyouyuan

铜虫 (小有名气)


humants(金币+1,VIP+0):谢。。不过不大好吧。。新透析袋含有很多金属离子等 5-6 14:32
我也做过透析袋相关实验,我们平时就是把剪好的透析袋保存于无水乙醇中,用的时候用蒸馏水洗净,然后在烧杯里面加入蒸馏水没过透析袋微波炉加热煮沸10分钟就可以了
[url=www.jianmili.com]简谜离[/url]
5楼2009-05-06 13:19:20
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