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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 质粒提取260/280＞2
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xmc9018

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒提取260/280＞2 已有2人参与

用4ml菌液提质粒，浓度为803，260/280=2. 15，260/230= 2. 33。
请问一下260/280＞2是什么原因啊

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1楼 2019-01-21 09:52:59
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niyinluo

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
1.需要看你酶切片段的大小，大的话浓度是比较低的，但不会影响后续实验的
2.需要看你质粒与酶量的比例
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5楼2019-01-22 10:59:38
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niyinluo

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 小冀- at 2019-01-22 09:40:19
酶切的时候加了多少质粒？我看你质粒浓度挺高的，酶切时间也不长，应该不至于切没了，应该是操作上或添加量上的问题~还有就是你65℃5min是做什么的？...

65℃5min    失活 酶
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6楼2019-01-22 11:00:21
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niyinluo

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 小冀- at 2019-01-22 11:06:20
这一步没有必要吧，跑胶的buffer里就有终止酶反应的试剂...

如果 不是立马就去跑胶的话。高温失活很必要的
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8楼2019-01-22 15:39:42
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