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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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xmc9018

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒提取260/280>2 已有2人参与

用4ml菌液提质粒,浓度为803,260/280=2. 15,260/230= 2. 33。
请问一下260/280>2是什么原因啊

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niyinluo

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.需要看你酶切片段的大小,大的话浓度是比较低的,但不会影响后续实验的
2.需要看你质粒与酶量的比例
5楼2019-01-22 10:59:38
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niyinluo

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 小冀- at 2019-01-22 09:40:19
酶切的时候加了多少质粒?我看你质粒浓度挺高的,酶切时间也不长,应该不至于切没了,应该是操作上或添加量上的问题~还有就是你65℃5min是做什么的?...

65℃5min    失活 酶
6楼2019-01-22 11:00:21
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niyinluo

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 小冀- at 2019-01-22 11:06:20
这一步没有必要吧,跑胶的buffer里就有终止酶反应的试剂...

如果 不是立马就去跑胶的话。高温失活很必要的
8楼2019-01-22 15:39:42
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