24小时热门版块排行榜    

查看: 1045  |  回复: 2

kidd0115

金虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质标记荧光侵染细胞的技术问题

大家好,我想用Cy3-NHS标记一个蛋白质混合物刺激细胞观察其亚细胞定位。按照说明书做了,3kD超滤管离心了好几次,得到的蛋白浓度测量发现损失很大。然后和巨噬细胞共同孵育4h,拍荧光时候只看到dapi染的细胞核,看不到目的蛋白在细胞内发出荧光,而光学显微镜白光居然可以看到像染料沉淀一样肉眼可见的玫瑰色在细胞外面一大坨。想问下谁有经验可以分享?

或者详细告知阁下做过荧光标记蛋白的具体步骤,我看看我哪里做错?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

15737926255

银虫 (正式写手)

2楼2019-01-18 12:20:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kidd0115

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 15737926255 at 2019-01-18 12:20:28
巨噬细胞压根没吞噬吧

按说4个小时该吞噬的都会吞进去了吧,做墨汁试验不也是几个小时的事情么?

还有一个问题是超滤后为什么有沉淀的问题?
3楼2019-01-19 10:22:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 kidd0115 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料277求调剂 +3 min3 2026-03-24 3/150 2026-03-25 11:57 by userper
[考研] 287求调剂 +10 晨昏线与星海 2026-03-19 11/550 2026-03-25 10:35 by userper
[考研] 289材料与化工(085600)B区求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:20 by mx.yue
[考研] 材料调剂 +6 匹克i 2026-03-23 6/300 2026-03-24 21:09 by greychen00
[考研] 【考研调剂】化学专业 281分,一志愿四川大学,诚心求调剂 +15 吃吃吃才有意义 2026-03-19 16/800 2026-03-24 19:51 by 了了了了。。
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 求调剂 +5 林之夕 2026-03-24 5/250 2026-03-24 17:16 by dick_runner
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考博] 申博26年 +4 八6八68 2026-03-19 4/200 2026-03-24 15:49 by 小Ben呵呵
[考研] 材料与化工328分调剂 +4 。,。,。,。i 2026-03-23 4/200 2026-03-24 11:03 by 544594351
[考研] 化学308分求调剂 +3 你好明天你好 2026-03-23 3/150 2026-03-23 20:11 by macy2011
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +6  ̄^ ̄゜汗 2026-03-19 9/450 2026-03-23 19:53 by pswait
[考研] 336求调剂 +4 收到VS 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:02 by macy2011
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 一志愿东华大学化学070300,求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 296求调剂 +4 www_q 2026-03-20 4/200 2026-03-21 17:26 by 学员8dgXkO
[考研] 296求调剂 +6 www_q 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
信息提示
请填处理意见