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o57933933

金虫 (正式写手)

[求助] 细胞如何在液氮中冻存 已有6人参与

有没有人可以给我详细的protocol,如何冻存细胞!在液氮里储存

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芳荷恋雨

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

细胞冻存操作流程
操作流程
1.        准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射30min
2.        紫外照射后开风机吹10min,酒精擦拭台面,试剂和所需耗材喷酒精后放入
3.        配置冻存液,如DMEM:FBSMSO比例为7:2:1或5:4:1,也可选择全血清冻存液FBSMSO为9:1,将冻存液放入4℃冰箱预冷
4.        按照传代的方法消化细胞,离心,弃上清
5.        加入冻存液重悬细胞,按照1管1ml分装好后放入程序降温盒
6.        将程序降温盒放入-80℃冰箱,过夜后取出,将细胞转入液氮罐
注意事项
1.        若要计数,可在终止消化后取少量细胞悬液进行计数
2.        冻存液加入到细胞中后,最好半小时内将程序降温盒转移到-80℃
3.        转入液氮罐前,细胞至少要在-80℃放3h
自己选的路,爬也要爬完
7楼2019-01-27 14:37:04
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xuelong920

新虫 (小有名气)

2楼2019-01-08 22:34:34
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w5e5f4

银虫 (正式写手)

慢冻速溶的方法  配冻存液血清:DMSO=1:9 ??打了一半不愿意打了

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3楼2019-01-09 08:06:20
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w5e5f4

银虫 (正式写手)

??先用冻存盒在-80℃ 放上24小时,说明书然后取出来 投入液氮

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4楼2019-01-09 08:07:49
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