应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 细胞如何在液氮中冻存
131/2返回列表12下一页
查看: 4319  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

o57933933

金虫 (正式写手)

[求助] 细胞如何在液氮中冻存 已有6人参与

有没有人可以给我详细的protocol，如何冻存细胞！在液氮里储存

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2019-01-08 13:53:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

19950515lai

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

建议步骤：4℃ 30min，-20℃ 2h，-80℃ 24h，然后就可以转移到液氮罐了。还有一种梯度冻存盒，盒子有夹层放异丙醇，可以直接放-80℃，然后一天后就可以放到液氮罐了。
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2019-01-15 15:34:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芳荷恋雨

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

细胞冻存操作流程
操作流程
1.        准备工作，开水浴锅，预热试剂，超净工作台紫外照射30min
2.        紫外照射后开风机吹10min，酒精擦拭台面，试剂和所需耗材喷酒精后放入
3.        配置冻存液，如DMEM:FBSMSO比例为7:2:1或5:4:1，也可选择全血清冻存液FBSMSO为9:1，将冻存液放入4℃冰箱预冷
4.        按照传代的方法消化细胞，离心，弃上清
5.        加入冻存液重悬细胞，按照1管1ml分装好后放入程序降温盒
6.        将程序降温盒放入-80℃冰箱，过夜后取出，将细胞转入液氮罐
注意事项
1.        若要计数，可在终止消化后取少量细胞悬液进行计数
2.        冻存液加入到细胞中后，最好半小时内将程序降温盒转移到-80℃
3.        转入液氮罐前，细胞至少要在-80℃放3h
赞一下(1人) 回复此楼
自己选的路，爬也要爬完
7楼2019-01-27 14:37:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

xuelong920

新虫 (小有名气)
网上有详细的教程啊

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2019-01-08 22:34:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

w5e5f4

银虫 (正式写手)
慢冻速溶的方法  配冻存液血清：DMSO=1:9 ??打了一半不愿意打了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2019-01-09 08:06:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

w5e5f4

银虫 (正式写手)
??先用冻存盒在-80℃ 放上24小时，说明书然后取出来 投入液氮

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2019-01-09 08:07:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

503276866

金虫 (小有名气)
慢冻快溶
回复此楼
没有最好只有更好
5楼2019-01-10 13:12:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
8楼2019-02-10 16:34:44
已阅   申请BioEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

龙猫测

木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

慢冻速溶的方法  配冻存液血清：DMSO=1:9 ,呵呵，我也不想打字了，发个邮箱给我，我发个教程给你吧，包括培养等的注意事项的都有
赞一下 回复此楼
9楼2019-02-12 11:59:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Lily珊瑚虫

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你是什么细胞啊？有时细胞不同，使用的冻存液会有差别。细胞比较脆弱的话，需要使用培养细胞的旧培养基与新鲜培养基1:1混合，在调整胎牛血清浓度，一般为20%;分装前加入DMSO，一般使用浓度8%。分装后可采用慢冻法：4度 30min;-20度 30min;-80度过夜；第二天转入液氮罐中保存。或直接使用冻存盒后再装入液氮罐中。
赞一下 回复此楼
Lily
10楼2019-03-01 14:34:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 o57933933 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +6 生物工程调剂 2026-03-17 10/500 2026-03-22 20:22 by edmund7
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-20 3/150 2026-03-22 16:00 by ColorlessPI
[考研] 一志愿华中科技大学071000，求调剂 +4 沿岸有贝壳6 2026-03-21 4/200 2026-03-22 07:21 by ilovexiaobin
[考研] 广西大学材料导师推荐 +3 夏夏夏小正 2026-03-17 5/250 2026-03-21 22:20 by 金昊ML
[考研] 材料工程专硕 348分求调剂 +3 冬辞. 2026-03-17 5/250 2026-03-21 18:47 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 278求调剂 +9 烟火先于春 2026-03-17 9/450 2026-03-21 17:47 by 学员8dgXkO
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 301求调剂 +10 yy要上岸呀 2026-03-17 10/500 2026-03-21 03:14 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +8 小材化本科 2026-03-18 8/400 2026-03-20 23:16 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 0703化学调剂 +5 pupcoco 2026-03-17 8/400 2026-03-19 13:58 by houyaoxu
[考研] 一志愿福大288有机化学，求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭