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jzy101jzy

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于组化的求助,敬请大佬解惑。

我现在要做关于病毒定位的组化。组织测过病毒含量(荧光定量),挺高的。一抗用的是自己做的高免血清(兔源,琼扩效价大于2的-3次方)。做了好几次都没信号。用PCNA单抗做一抗,效果很好,至少说明我做组化的手法没问题。请教我的问题出在哪了,怎么解决?

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jiaq_0101

金虫 (著名写手)

另外有没有试过用多抗做病毒中和试验测一下效价,确定高免血清中有活性抗体。琼扩得到的可能是非特异的杂蛋白产生的抗体

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5楼2019-01-18 12:29:28
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jiaq_0101

金虫 (著名写手)

请问是什么病毒?多抗是用什么做的?是灭活病毒?还是表达的蛋白?抗原修复用的什么方法?

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2楼2019-01-17 23:07:24
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jzy101jzy

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jiaq_0101 at 2019-01-17 23:07:24
请问是什么病毒?多抗是用什么做的?是灭活病毒?还是表达的蛋白?抗原修复用的什么方法?

禽腺病毒,用抽提以后的灭活全病毒做的兔血清。枸橼酸缓冲液热修复10min。

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3楼2019-01-18 09:53:15
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jiaq_0101

金虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by jzy101jzy at 2019-01-18 09:53:15
禽腺病毒,用抽提以后的灭活全病毒做的兔血清。枸橼酸缓冲液热修复10min。
...

有可能是1.灭活病毒造成抗原变化;2.抗原修复不合适。
建议试试1.有康复或者临床阳性血清来试试;2.换蛋白酶K。

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4楼2019-01-18 12:18:14
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