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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 畜牧兽医 » 关于组化的求助，敬请大佬解惑。
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jzy101jzy

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于组化的求助，敬请大佬解惑。

我现在要做关于病毒定位的组化。组织测过病毒含量（荧光定量），挺高的。一抗用的是自己做的高免血清（兔源，琼扩效价大于2的－3次方）。做了好几次都没信号。用PCNA单抗做一抗，效果很好，至少说明我做组化的手法没问题。请教我的问题出在哪了，怎么解决？

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1楼 2019-01-06 16:17:28
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jiaq_0101

金虫 (著名写手)
请问是什么病毒？多抗是用什么做的？是灭活病毒？还是表达的蛋白？抗原修复用的什么方法？

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2楼2019-01-17 23:07:24
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jzy101jzy

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jiaq_0101 at 2019-01-17 23:07:24
请问是什么病毒？多抗是用什么做的？是灭活病毒？还是表达的蛋白？抗原修复用的什么方法？

禽腺病毒，用抽提以后的灭活全病毒做的兔血清。枸橼酸缓冲液热修复10min。

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3楼2019-01-18 09:53:15
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jiaq_0101

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jzy101jzy at 2019-01-18 09:53:15
禽腺病毒，用抽提以后的灭活全病毒做的兔血清。枸橼酸缓冲液热修复10min。
...

有可能是1.灭活病毒造成抗原变化；2.抗原修复不合适。
建议试试1.有康复或者临床阳性血清来试试；2.换蛋白酶K。

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4楼2019-01-18 12:18:14
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jiaq_0101

金虫 (著名写手)
另外有没有试过用多抗做病毒中和试验测一下效价，确定高免血清中有活性抗体。琼扩得到的可能是非特异的杂蛋白产生的抗体

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5楼2019-01-18 12:29:28
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