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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 质谱分析 » 单抗高聚体LC-MS分析
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qiji6368

银虫 (小有名气)

[求助] 单抗高聚体LC-MS分析 已有1人参与

各位大侠：
    单抗经SEC馏分收集高聚体，浓缩后进行LC-ESI-MS实验，现在用的 Zenix-C SEC-150的柱子，流动相为80%H2O、20%乙腈、0.05%TFA，结果显示TUV图中显示一个峰，解卷积后质量为单体和二聚体，丰度比例为10:1，请问有什么方法可以将单体和二聚体分开？或者关于高聚体质谱分析实验有什么更好的建议或方法？谢谢
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1楼 2019-01-04 14:21:43
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qiji6368

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wy19871124 at 2019-01-04 18:12:49
这个二聚体应该是电离的时候产生的二聚体离子2M+H+,可以通过降低样品浓度或增加锥孔电压或增加反吹气流量，加以抑制。
如果是样品本身的聚合物，那就需要改变液相分析条件予以分离了
...

你好，我们是想检测高聚体。
1、在液相实验时用的流动相含有盐，单体和多聚体能分开，但是在液质实验换了不含盐流动相时，单体和高聚体分离不开。
2、流动相为加醋酸铵时，UV图可以看出高聚体和单体分开了，但是相应的TIC图没有想要的蛋白质谱信号。

请问大侠，能有什么办法既能将单体和高聚体分离，又能检测到相应质谱信号？
谢谢！！
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3楼2019-01-07 09:29:02
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wy19871124

新虫 (职业作家)

质谱首席顾问
这个二聚体应该是电离的时候产生的二聚体离子2M+H+,可以通过降低样品浓度或增加锥孔电压或增加反吹气流量，加以抑制。
如果是样品本身的聚合物，那就需要改变液相分析条件予以分离了

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2楼2019-01-04 18:12:49
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dkfasdlkf

捐助贵宾 (文坛精英)

易析科技

【答案】应助回帖

可以尝试用UPLCMSMS，我这有一台，可以帮你试试
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4楼2019-01-08 14:22:18
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