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qiji6368

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[求助] 单抗高聚体LC-MS分析已有1人参与

各位大侠：
单抗经SEC馏分收集高聚体，浓缩后进行LC-ESI-MS实验，现在用的 Zenix-C SEC-150的柱子，流动相为80%H2O、20%乙腈、0.05%TFA，结果显示TUV图中显示一个峰，解卷积后质量为单体和二聚体，丰度比例为10:1，请问有什么方法可以将单体和二聚体分开？或者关于高聚体质谱分析实验有什么更好的建议或方法？谢谢

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1楼 2019-01-04 14:21:43

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qiji6368

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引用回帖:

2楼: Originally posted by wy19871124 at 2019-01-04 18:12:49
这个二聚体应该是电离的时候产生的二聚体离子2M+H+,可以通过降低样品浓度或增加锥孔电压或增加反吹气流量，加以抑制。
如果是样品本身的聚合物，那就需要改变液相分析条件予以分离了
...

你好，我们是想检测高聚体。
1、在液相实验时用的流动相含有盐，单体和多聚体能分开，但是在液质实验换了不含盐流动相时，单体和高聚体分离不开。
2、流动相为加醋酸铵时，UV图可以看出高聚体和单体分开了，但是相应的TIC图没有想要的蛋白质谱信号。

请问大侠，能有什么办法既能将单体和高聚体分离，又能检测到相应质谱信号？
谢谢！！