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qiji6368

银虫 (小有名气)

[求助] 单抗高聚体LC-MS分析 已有1人参与

各位大侠:
    单抗经SEC馏分收集高聚体,浓缩后进行LC-ESI-MS实验,现在用的 Zenix-C SEC-150的柱子,流动相为80%H2O、20%乙腈、0.05%TFA,结果显示TUV图中显示一个峰,解卷积后质量为单体和二聚体,丰度比例为10:1,请问有什么方法可以将单体和二聚体分开?或者关于高聚体质谱分析实验有什么更好的建议或方法?谢谢
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wy19871124

新虫 (职业作家)

质谱首席顾问

这个二聚体应该是电离的时候产生的二聚体离子2M+H+,可以通过降低样品浓度或增加锥孔电压或增加反吹气流量,加以抑制。
如果是样品本身的聚合物,那就需要改变液相分析条件予以分离了

发自小木虫Android客户端
2楼2019-01-04 18:12:49
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qiji6368

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wy19871124 at 2019-01-04 18:12:49
这个二聚体应该是电离的时候产生的二聚体离子2M+H+,可以通过降低样品浓度或增加锥孔电压或增加反吹气流量,加以抑制。
如果是样品本身的聚合物,那就需要改变液相分析条件予以分离了
...

你好,我们是想检测高聚体。
1、在液相实验时用的流动相含有盐,单体和多聚体能分开,但是在液质实验换了不含盐流动相时,单体和高聚体分离不开。
2、流动相为加醋酸铵时,UV图可以看出高聚体和单体分开了,但是相应的TIC图没有想要的蛋白质谱信号。

请问大侠,能有什么办法既能将单体和高聚体分离,又能检测到相应质谱信号?
谢谢!!
3楼2019-01-07 09:29:02
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dkfasdlkf

捐助贵宾 (文坛精英)

易析科技


【答案】应助回帖

可以尝试用UPLCMSMS,我这有一台,可以帮你试试
4楼2019-01-08 14:22:18
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