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liu33feng

[交流] 请问流动相选择

请问达人:
     我的提取物首先经萃取,活性物质在正丁醇部分,然后氯仿甲醇梯度洗脱过硅胶柱,活性物质在最先出来的组分当中,然后走hplc,甲醇水梯度洗脱出来各组分,然后想点板看看,流动相用了氯仿:甲醇  50:1 。。。。几个比例,都不理想。紫外观察好像跑在最前面边缘线了,不知是不是极性再调小点。
   由于业余不太懂,希望大家能 给点建议。

[ Last edited by liu33feng on 2009-5-4 at 15:05 ]
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sara_wang

金虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供! 5-5 00:17
你用氯仿:甲醇做展开剂,还是高效液相的流动相啊?
如果你指的是展板用的展开剂你可以试试石油醚:乙酸乙酯(10:1)看看
2楼2009-05-04 14:52:44
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right304

木虫 (正式写手)

应该先用TLC调试展开剂的比例,各组成分能分开且效果好的情况下,再跑柱子,这时再将展开剂的极性做微小的调整,就是过柱子适用的流动相.
3楼2009-05-04 14:57:27
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云水泱泱

铜虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):3Q 5-5 00:17
你的正丁醇部分过了大孔没?先过一个大孔就好分一些。大孔后面走出来的极性较小的东西,有得甚至可以用正相柱分离,而前面走出来的先用反相粗分,后面再用凝胶或用HPLC制备。
你所说的应该可以用正相分,如果石油醚:乙酸乙酯系统还不行,可以再试一试石油醚:丙酮系统,再不然试试氯仿:丙酮或氯仿:乙酸乙酯(虽然这种体系很少人用,但是有的东西就是用这种体系展的开)。
万里苍穹任飞翔
4楼2009-05-04 15:24:04
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liu33feng

谢谢哦。没有过大孔哦。
5楼2009-05-04 15:54:51
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