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liu33feng

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[交流] 请问流动相选择

请问达人：
我的提取物首先经萃取,活性物质在正丁醇部分，然后氯仿甲醇梯度洗脱过硅胶柱，活性物质在最先出来的组分当中，然后走hplc，甲醇水梯度洗脱出来各组分，然后想点板看看，流动相用了氯仿：甲醇 50：1 。。。。几个比例，都不理想。紫外观察好像跑在最前面边缘线了，不知是不是极性再调小点。
由于业余不太懂，希望大家能给点建议。

[ Last edited by liu33feng on 2009-5-4 at 15:05 ]

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1楼 2009-05-04 14:21:34

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云水泱泱

铜虫 (小有名气)

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★
karl2100(金币+1,VIP+0):3Q 5-5 00:17

你的正丁醇部分过了大孔没？先过一个大孔就好分一些。大孔后面走出来的极性较小的东西，有得甚至可以用正相柱分离，而前面走出来的先用反相粗分，后面再用凝胶或用HPLC制备。
你所说的应该可以用正相分，如果石油醚：乙酸乙酯系统还不行，可以再试一试石油醚：丙酮系统，再不然试试氯仿：丙酮或氯仿：乙酸乙酯（虽然这种体系很少人用，但是有的东西就是用这种体系展的开）。