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质粒提取问题
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我提取的土壤中抗生素抗性基因。以sul2基因为例,提取的总DNAPCR后进行了切胶纯化,克隆,质粒提取。得到的质粒A260/280≥1.8。A260/230>2。纯度是没问题了,但是浓度才30ng/ul。洗脱用的50ul灭菌水,质粒DNA总量才1.5ug。但是说明书上说最少可以得到10ug质粒DNA。我是取过夜培养的菌液1.5ml进行质粒提取的。用的也是高拷贝质粒,不知道为什么洗脱DNA总量这么少?我想问下这个浓度下的质粒DNA能用来测序和制作qPCR的标准曲线吗?求大神指教,谢谢 发自小木虫Android客户端 |
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