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Timy123

新虫 (初入文坛)

[交流] CRISPR Cas9双质粒系统中pTarget质粒的消除已有5人参与

我用IPTG诱导含有双质粒的菌,长起来之后划线,再挑菌验证,结果接到K和Sp抗性的试管都长了,按理来说消除掉pTarget的菌不应该在sp抗性的试管里生长了,有消除这个质粒经验的大神吗?谢谢

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粽子君

铁虫 (初入文坛)


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引用回帖:
8楼: Originally posted by 小木无虫 at 2019-10-23 11:59:12
诱导之后划线单克隆,挑选消除的单克隆
...

我也是啊,但是挑出来的全都能在Spe抗性上长出来,说明没消除掉,是我挑的不够多吗
9楼2019-10-23 12:13:59
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
多传代几次,才能把质粒彻底消除

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2楼2018-12-23 22:32:56
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Timy123

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2018-12-23 22:32:56
多传代几次,才能把质粒彻底消除

谢谢~

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3楼2018-12-27 21:48:12
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JM109

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
楼主好,我也在做这个,想问下你第二个质粒是用何种方法转化到宿主的

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4楼2019-01-05 12:33:37
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