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岁月无迹

木虫 (小有名气)

沉底

[求助] 新手求助米氏方程如何确定反应初速的? 已有1人参与

本人初次接触模拟酶,做了一个拟过氧化物酶,用TMB显色法做了表征,想要通过米氏方程算Km和Vmax, 做了不同TMB和双氧水浓度下显色反应的吸光度。我看到有些文献中也是这些数据然后就有速度与浓度的曲线,然后取对数由米氏方程得出Km和Vmax。我想请问一下这个反应速度该怎么算,谢谢
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有些事情就是这样,一旦决定要做了,就勇往直前大胆去做,如果错过了,可能也就没机会再做了。
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岁月无迹

木虫 (小有名气)

沉底


drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2019-02-09 11:35:30
引用回帖:
2楼: Originally posted by 林夕_阳 at 2019-01-26 22:08:49
你好 可以交流下吗?我在做这个 出现了不加过氧化氢显色的问题

你考虑一下是不是有什么氧化还原性的物质引入了,例如原料污染等。我之前也有这个现象,经过逐个排查发现是原料可能有些污染
有些事情就是这样,一旦决定要做了,就勇往直前大胆去做,如果错过了,可能也就没机会再做了。
3楼2019-02-09 09:12:39
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查看全部 7 个回答

林夕_阳

铜虫 (小有名气)

你好 可以交流下吗?我在做这个 出现了不加过氧化氢显色的问题
纷繁世界,少则明,多则惑。
2楼2019-01-26 22:08:49
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呜呜拥有你

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你好,过氧化物酶测定TMB时候的米氏常数时候,是不是同时也在氧化双氧水,所以楼主你是怎么确定各自的浓度关系的,我现在做ABTS,证载纠结这一点
4楼2019-04-17 11:53:26
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fiestar

铜虫 (初入文坛)

初速度怎么确定的,知道了吗?
优秀是一种习惯
5楼2019-04-28 21:11:58
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