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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 新手求助米氏方程如何确定反应初速的?
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岁月无迹

木虫 (小有名气)

沉底

[求助] 新手求助米氏方程如何确定反应初速的? 已有1人参与

本人初次接触模拟酶，做了一个拟过氧化物酶，用TMB显色法做了表征，想要通过米氏方程算Km和Vmax, 做了不同TMB和双氧水浓度下显色反应的吸光度。我看到有些文献中也是这些数据然后就有速度与浓度的曲线，然后取对数由米氏方程得出Km和Vmax。我想请问一下这个反应速度该怎么算，谢谢
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有些事情就是这样，一旦决定要做了，就勇往直前大胆去做，如果错过了，可能也就没机会再做了。
1楼 2018-12-13 17:36:49
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林夕_阳

铜虫 (小有名气)
你好 可以交流下吗？我在做这个 出现了不加过氧化氢显色的问题
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纷繁世界，少则明，多则惑。
2楼2019-01-26 22:08:49
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岁月无迹

木虫 (小有名气)

沉底
★
drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2019-02-09 11:35:30
引用回帖:
2楼: Originally posted by 林夕_阳 at 2019-01-26 22:08:49
你好 可以交流下吗？我在做这个 出现了不加过氧化氢显色的问题

你考虑一下是不是有什么氧化还原性的物质引入了，例如原料污染等。我之前也有这个现象，经过逐个排查发现是原料可能有些污染
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有些事情就是这样，一旦决定要做了，就勇往直前大胆去做，如果错过了，可能也就没机会再做了。
3楼2019-02-09 09:12:39
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呜呜拥有你

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你好，过氧化物酶测定TMB时候的米氏常数时候，是不是同时也在氧化双氧水，所以楼主你是怎么确定各自的浓度关系的，我现在做ABTS，证载纠结这一点
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4楼2019-04-17 11:53:26
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fiestar

铜虫 (初入文坛)
初速度怎么确定的，知道了吗？
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优秀是一种习惯
5楼2019-04-28 21:11:58
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彩虹0628

新虫 (初入文坛)
楼主您好，我最近也在做这个实验，请问您的问题解决了吗

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6楼2021-08-16 00:00:28
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xivrg

新虫 (小有名气)
请问楼主知道怎么确定初速度了吗

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7楼2021-10-09 10:19:29
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