24小时热门版块排行榜    

查看: 1587  |  回复: 5

wx0614

新虫 (初入文坛)

[交流] 求大神指导 已有3人参与

我的重组质粒转化之后挑取单克隆菌株,PCr检测可以p出插入片段条带,但是提完质粒之后在做酶切检测就只剩下载体条带了,这是怎么回事呢?酶(xho1+nde1)载体大概5k,片段1k

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xinxinjin

银虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
酶切之后,没有目的条带 是吧

发自小木虫Android客户端
2楼2018-12-10 10:31:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wx0614

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xinxinjin at 2018-12-10 10:31:14
酶切之后,没有目的条带 是吧

是呢

发自小木虫Android客户端
3楼2018-12-10 14:44:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nicegreat

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你是直接用培养基上的单克隆PCR的吧?你的平板上有你的片段,你所谓能p出来其实是以你的片段为模板。所以你的片段可能根本就没连上载体。

发自小木虫Android客户端
4楼2018-12-10 16:40:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nicegreat

新虫 (小有名气)

可以在载体上设计一条引物,另一条用你的基因引物,一般p出来就没问题

发自小木虫Android客户端
5楼2018-12-10 16:42:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1034714749

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1.使用载体的通用引物再p,这样才准确一点
2.能p出来也代表挑取的菌落里有片段,确认是否是单克隆菌落
3.酶切验证用单双酶切同时做,单酶切是6k,双酶切只发现载体片段可能只是浓度低
6楼2018-12-10 16:52:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wx0614 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +17 chaojifeixia 2026-03-19 19/950 2026-03-23 23:26 by 呆呆师姐
[考研] 0854 考研调剂 招生了!AI 方向 +4 pk3725069 2026-03-19 16/800 2026-03-23 23:09 by 汪!?!
[考研] 361求调剂 +3 Glack 2026-03-22 3/150 2026-03-23 22:03 by fuyu_
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 265求调剂 +10 梁梁校校 2026-03-17 10/500 2026-03-23 21:17 by 一切OK
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +3 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 3/150 2026-03-23 20:47 by pswait
[考研] 招08考数学 +6 laoshidan 2026-03-20 14/700 2026-03-23 14:37 by 15614359529
[考研] 求老师收我 +3 zzh16938784 2026-03-23 3/150 2026-03-23 12:56 by ztnimte
[考研] 352求调剂 +3 大米饭! 2026-03-22 3/150 2026-03-22 23:28 by king123!
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 269专硕求调剂 +6 金恩贝 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:31 by ColorlessPI
[考研] 一志愿北京化工大学070300 学硕336求调剂 +5 vv迷 2026-03-21 8/400 2026-03-22 14:20 by ColorlessPI
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 303求调剂 +5 睿08 2026-03-17 7/350 2026-03-21 03:11 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武汉理工材料工程专硕调剂 +9 Doleres 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:36 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
信息提示
请填处理意见