24小时热门版块排行榜    

查看: 2378  |  回复: 4

Korea??

新虫 (正式写手)

[求助] 最近小提质粒的浓度都很低,酶切回收后基本就没有了 已有1人参与

不知道是什么原因,实验室在大肠杆菌中保存的T载体质粒,提取后浓度都很低。酶切纯化回收电泳基本没条带了。平板也划了,连续继带了几次后,小提质粒还行,但到酶切纯化回收这一步,浓度加到最大也是基本没有条带。质粒失效还是丢失了呢?

发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1034714749

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
限于提质粒这一步正常的话,建议分析几个原因:
1.是否酶切的问题,酶切完可以选择跑胶试下,另外酶切时间和温度是否合适
2.酶切后是否马上开始纯化回收?
3.检查纯化回收试剂盒是否失效,或者试剂用错,只要有质粒,且酶切后也存在,是不会一点也没有的
4.酶切完可以用切胶回收尝试一下
2楼2018-11-28 16:06:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Korea??

新虫 (正式写手)

一般酶切结束就立马纯化胶回收,回收率很低,连接转化效果很差

发自小木虫IOS客户端
3楼2018-11-28 19:22:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

想要读博

铜虫 (正式写手)

原因很多,先看自己操作有没有问题,不是自己再做一遍,找个人同样步骤同样环境再做一遍,如果别人能做出来,那就是你的问题,如果都没有,就考虑载体是不是保存不当,不能用了,借其他实验室能坐出来去连接,还有考虑酶,酶有没有保存不当,失火了,还有是不是你的氨苄不行了,因为这个问题前段时间我们也出现,不要先去找老师,老师可能不帮你,帮了也会批评你。该做的都做了,还没结果,再去找老师,我们那次的问题是新换的同厂家的高效酶有问题,退货用普通酶可以做出来。

发自小木虫Android客户端
你若盛开,清风自来
4楼2018-11-28 19:42:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yubeihong

铁杆木虫 (职业作家)


5楼2018-12-13 22:20:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Korea?? 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿北京化工大学 070300 学硕 336分 求调剂 +7 vv迷 2026-03-22 7/350 2026-03-23 23:44 by Txy@872106
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +7 jhybd 2026-03-23 11/550 2026-03-23 23:29 by 呆呆师姐
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分,求调剂 +5 jiajunX 2026-03-22 5/250 2026-03-23 18:07 by YMU施老师
[考研] 上海电力大学材料防护与新材料重点实验室招收调剂研究生(材料、化学、电化学,环境) +3 我爱学电池 2026-03-23 3/150 2026-03-23 17:16 by AZMK
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +3 Promise-jyl 2026-03-23 3/150 2026-03-23 13:43 by wangkm
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +8 tcxiaoxx 2026-03-20 9/450 2026-03-23 12:16 by tcxiaoxx
[考研] 307求调剂 +3 余意卿 2026-03-21 3/150 2026-03-23 10:32 by Iveryant
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 考研调剂 +4 来好运来来来 2026-03-21 4/200 2026-03-22 12:15 by 星空星月
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[基金申请] 学校已经提交到NSFC,还能修改吗? 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 材料与化工(0856)304求 B区 调剂 +3 邱gl 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:47 by lature00
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 308求调剂 +3 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 3/150 2026-03-20 23:24 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +7 司空. 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:08 by JourneyLucky
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
[考研] 求调剂 +3 eation27 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:32 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
信息提示
请填处理意见