24小时热门版块排行榜    

查看: 1897  |  回复: 8

秋犯

银虫 (正式写手)

[求助] 求助-土壤微生物的获取及确定其生长曲线 已有1人参与

实验需要从土壤中提取微生物,做生长曲线确定达到对数生长期的时间。
但是,目前培养的微生物几乎不长,OD值很小,没有理想的实验结果。
第一次做微生物实验,很多地方不懂,以下是实验过程,请大家看一下有没有错误的。

20g土壤+100ml纯水震荡一晚上,取悬浊液标记为10^-1
稀释至10^-2、10^-3、10^-4
取以上不同梯度的菌液5ml ,加到100ml培养基中(培养基主要成分为葡萄糖、蛋白胨少量,以及一些无机元素)
在37℃,60rpm震荡培养,每隔1h拿出来OD600。

目前做过两次实验,OD值一直在0.005-0.011,还有负值。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

赵统超

木虫 (正式写手)

竟然有负值,我觉得可能是你紫外操作有问题,而且培养时间短现象不明显。

发自小木虫Android客户端
2楼2018-11-27 11:59:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秋犯

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 赵统超 at 2018-11-27 11:59:53
竟然有负值,我觉得可能是你紫外操作有问题,而且培养时间短现象不明显。

分光光度计操作应该没问题,上次做了这几个时间点
0h    2h    3.5h     6h    20h
0.05  0.057  0.105  0.023  0.017
-0.009 0.007 0.009 0.006 0.005
之前用的一台新的分光光度计,吸光度一直跳,较不到零点,后来换老的还好点。
怀疑没从土壤里面提取到微生物,或者培养基不合适

发自小木虫Android客户端
3楼2018-11-27 12:10:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

赵统超

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 秋犯 at 2018-11-27 12:10:33
分光光度计操作应该没问题,上次做了这几个时间点
0h    2h    3.5h     6h    20h
0.05  0.057  0.105  0.023  0.017
-0.009 0.007 0.009 0.006 0.005
之前用的一台新的分光光度计,吸光度一直跳,较不到零点,后 ...

你提取的微生物是需氧还是厌氧

发自小木虫Android客户端
4楼2018-11-27 12:57:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秋犯

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 赵统超 at 2018-11-27 12:57:09
你提取的微生物是需氧还是厌氧
...

不太懂,应该是都有的。我震荡培养的时候三角瓶是加棉塞的,有影响吗

发自小木虫Android客户端
5楼2018-11-27 14:44:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

y214575

金虫 (小有名气)

生物工程师

土层深度是多少?可以先在平板上培养土粒,看看都有那些菌建议增长培养时间

发自小木虫Android客户端
6楼2018-11-29 15:59:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秋犯

银虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by y214575 at 2018-11-29 15:59:28
土层深度是多少?可以先在平板上培养土粒,看看都有那些菌建议增长培养时间

15cm附近,不是很精确的采的。我的培养基灭完菌后有颜色,对od600的测定有影响吗,还有看网上说看到一般是用od600,这个波长一定合适吗。

发自小木虫Android客户端
7楼2018-11-29 17:14:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

y214575

金虫 (小有名气)

生物工程师

引用回帖:
7楼: Originally posted by 秋犯 at 2018-11-29 17:14:37
15cm附近,不是很精确的采的。我的培养基灭完菌后有颜色,对od600的测定有影响吗,还有看网上说看到一般是用od600,这个波长一定合适吗。
...

有点颜色没关系,当你养起来时候很明显是浑浊的,肉眼可分的,先看能不能长在分离纯培养测曲线。

发自小木虫Android客户端
8楼2018-12-01 14:58:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

祁彻彻

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
小冀-: 金币+2, 鼓励回帖,有帮助 2018-12-05 11:04:10
建议先在固体培养基上分区划线培养,再接种到液体培养基中,反复几次后,活性就变得比较好了
9楼2018-12-05 09:01:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 秋犯 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 HFw0lei2R37i 2026-08-14 7/350 2026-08-15 00:40 by 4wMiSEwB6436
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +23 医学老男孩 2026-08-13 49/2450 2026-08-14 20:02 by zhaifei
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +10 Tide man 2026-08-10 11/550 2026-08-14 10:30 by 沁言学术
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
请填处理意见