24小时热门版块排行榜    

查看: 1480  |  回复: 8

秋犯

银虫 (正式写手)

[求助] 求助-土壤微生物的获取及确定其生长曲线 已有1人参与

实验需要从土壤中提取微生物,做生长曲线确定达到对数生长期的时间。
但是,目前培养的微生物几乎不长,OD值很小,没有理想的实验结果。
第一次做微生物实验,很多地方不懂,以下是实验过程,请大家看一下有没有错误的。

20g土壤+100ml纯水震荡一晚上,取悬浊液标记为10^-1
稀释至10^-2、10^-3、10^-4
取以上不同梯度的菌液5ml ,加到100ml培养基中(培养基主要成分为葡萄糖、蛋白胨少量,以及一些无机元素)
在37℃,60rpm震荡培养,每隔1h拿出来OD600。

目前做过两次实验,OD值一直在0.005-0.011,还有负值。
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

赵统超

木虫 (正式写手)

竟然有负值,我觉得可能是你紫外操作有问题,而且培养时间短现象不明显。

发自小木虫Android客户端
2楼2018-11-27 11:59:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秋犯

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 赵统超 at 2018-11-27 11:59:53
竟然有负值,我觉得可能是你紫外操作有问题,而且培养时间短现象不明显。

分光光度计操作应该没问题,上次做了这几个时间点
0h    2h    3.5h     6h    20h
0.05  0.057  0.105  0.023  0.017
-0.009 0.007 0.009 0.006 0.005
之前用的一台新的分光光度计,吸光度一直跳,较不到零点,后来换老的还好点。
怀疑没从土壤里面提取到微生物,或者培养基不合适

发自小木虫Android客户端
3楼2018-11-27 12:10:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

赵统超

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 秋犯 at 2018-11-27 12:10:33
分光光度计操作应该没问题,上次做了这几个时间点
0h    2h    3.5h     6h    20h
0.05  0.057  0.105  0.023  0.017
-0.009 0.007 0.009 0.006 0.005
之前用的一台新的分光光度计,吸光度一直跳,较不到零点,后 ...

你提取的微生物是需氧还是厌氧

发自小木虫Android客户端
4楼2018-11-27 12:57:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秋犯

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 赵统超 at 2018-11-27 12:57:09
你提取的微生物是需氧还是厌氧
...

不太懂,应该是都有的。我震荡培养的时候三角瓶是加棉塞的,有影响吗

发自小木虫Android客户端
5楼2018-11-27 14:44:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

y214575

金虫 (小有名气)

生物工程师

土层深度是多少?可以先在平板上培养土粒,看看都有那些菌建议增长培养时间

发自小木虫Android客户端
6楼2018-11-29 15:59:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

秋犯

银虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by y214575 at 2018-11-29 15:59:28
土层深度是多少?可以先在平板上培养土粒,看看都有那些菌建议增长培养时间

15cm附近,不是很精确的采的。我的培养基灭完菌后有颜色,对od600的测定有影响吗,还有看网上说看到一般是用od600,这个波长一定合适吗。

发自小木虫Android客户端
7楼2018-11-29 17:14:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

y214575

金虫 (小有名气)

生物工程师

引用回帖:
7楼: Originally posted by 秋犯 at 2018-11-29 17:14:37
15cm附近,不是很精确的采的。我的培养基灭完菌后有颜色,对od600的测定有影响吗,还有看网上说看到一般是用od600,这个波长一定合适吗。
...

有点颜色没关系,当你养起来时候很明显是浑浊的,肉眼可分的,先看能不能长在分离纯培养测曲线。

发自小木虫Android客户端
8楼2018-12-01 14:58:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

祁彻彻

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
小冀-: 金币+2, 鼓励回帖,有帮助 2018-12-05 11:04:10
建议先在固体培养基上分区划线培养,再接种到液体培养基中,反复几次后,活性就变得比较好了
9楼2018-12-05 09:01:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 秋犯 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 070300化学求调剂 +3 苑豆豆 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:48 by ColorlessPI
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 一志愿东华大学化学070300,求调剂 +5 2117205181 2026-03-21 6/300 2026-03-22 14:18 by ColorlessPI
[考研] 318求调剂 +4 plum李子 2026-03-21 7/350 2026-03-22 14:17 by ColorlessPI
[考研] 生物学一志愿985,分数349求调剂 +4 zxts12 2026-03-21 7/350 2026-03-22 09:57 by zxts12
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +5 生物工程调剂 2026-03-17 9/450 2026-03-21 23:32 by zhujy1982
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 299求调剂 +4 某某某某位 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:30 by barlinike
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 310求调剂 +3 baibai1314 2026-03-16 3/150 2026-03-21 03:56 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学,080502,354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境专硕,总分308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:39 by JourneyLucky
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 308求调剂 +3 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 3/150 2026-03-20 23:24 by JourneyLucky
[考研] 中南大学化学学硕337求调剂 +3 niko- 2026-03-19 6/300 2026-03-20 21:58 by luoyongfeng
[考研] 生物学调剂招人!!! +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考研] 【同济软件】软件(085405)考研求调剂 +3 2026eternal 2026-03-18 3/150 2026-03-18 19:09 by 搏击518
[考研] 301求调剂 +4 A_JiXing 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:32 by ruiyingmiao
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林,给自己招师弟中~ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
信息提示
请填处理意见