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新虫 (初入文坛)

[求助] 间接ELISA法测抑制,曾做出来有效果,但之后一直测不到抑制

本人合成了一批对AOZ进行修饰的人工抗原,在免疫小鼠后,采血取血清,用ELISA间接法测定。在做其中一个抗原4免后的血清时,通过在抗血清中加入NPAOZ竞争药物(1ug/ml),当时测到了有抑制效果,B/B0 最低有0.3。但是后来再用同批血清再测阻断,做IC50 时就测不到有抑制了,加了竞争药物的和没有加竞争药物的抗血清测得的OD几乎没有区别。想请教一下大家,有没有遇过类似的问题,是如何解决的?
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