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shengji

金虫 (正式写手)

[求助] CHO-K1细胞培养的问题已有2人参与

各位大神,有谁养过CHO-K1细胞,我们实验室在武汉的中国微生物保藏中心买了两瓶CHO-K1细胞,这个细胞传代时,一般离心需要多大的转速,我用1000g x5min,离心后上清还有很多细胞,而且看不到有沉淀,有没有养过这种细胞的,另外T75瓶传代一般需要多大的细胞数量才可以,请各位大神指点
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车到山前必有路。。。
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张小小Y

新虫 (小有名气)

2楼2018-11-21 16:42:07
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张小小Y

新虫 (小有名气)

至接种的细胞密度要看你的细胞状态吧,状态不好多接点状态好少接点,贴壁细胞接种很少计数传代吧,目测细胞能占30%的细胞密度应该可以吧,很久不做贴壁了,仅供参考

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3楼2018-11-21 16:45:27
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shengji

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 张小小Y at 2018-11-21 16:42:07
200-250g就可以了吧

您好,200g离心多长时间?
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4楼2018-11-22 15:23:13
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张小小Y

新虫 (小有名气)

5楼2018-11-22 15:34:09
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shengji

金虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 张小小Y at 2018-11-22 15:34:09
5分钟就可以吧

您好,你是养这种细胞吧,我第一次养,这种细胞在高倍镜下看是什么样的?我T25培养瓶,换液后,培养一天感觉细胞数量没怎么变化,而培养基颜色已变浅,在低倍镜下看细胞状态很正常,只是没长满,高倍镜下不知细胞是什么样的,您有高倍镜下的细胞图片吗?我怀疑是不是染菌导致细胞不长,高倍镜下看细胞不是那种梭型的,不知什么样的才是正常状态,我想参考一下。
车到山前必有路。。。
6楼2018-11-22 16:39:53
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张小小Y

新虫 (小有名气)

我现在都是做悬浮的了,你可以去ATCC上看看细胞形态,如果是你说的状态,有可能是支原体感染,你可以具体的查阅一下支原体感染的具体状态看看跟你的是否符合

发自小木虫Android客户端
7楼2018-11-22 18:13:00
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shengji

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 张小小Y at 2018-11-22 18:13:00
我现在都是做悬浮的了,你可以去ATCC上看看细胞形态,如果是你说的状态,有可能是支原体感染,你可以具体的查阅一下支原体感染的具体状态看看跟你的是否符合

好的,谢谢
车到山前必有路。。。
8楼2018-11-23 10:54:05
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shengji

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 张小小Y at 2018-11-22 18:13:00
我现在都是做悬浮的了,你可以去ATCC上看看细胞形态,如果是你说的状态,有可能是支原体感染,你可以具体的查阅一下支原体感染的具体状态看看跟你的是否符合

您好,支原体感染后培养基会变浑浊吗?我的培养基很澄清
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9楼2018-11-23 11:02:29
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harmonywen

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
支原体不会导致培养浑浊,细菌污染才会引起浑浊。而且支原体肉眼是看不到的,只能用PCR检测,或者染DAPI检测。
10楼2018-11-23 12:14:15
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