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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » CHO-K1细胞培养的问题
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shengji

金虫 (正式写手)

[求助] CHO-K1细胞培养的问题 已有2人参与

各位大神，有谁养过CHO-K1细胞，我们实验室在武汉的中国微生物保藏中心买了两瓶CHO-K1细胞，这个细胞传代时，一般离心需要多大的转速，我用1000g x5min，离心后上清还有很多细胞，而且看不到有沉淀，有没有养过这种细胞的，另外T75瓶传代一般需要多大的细胞数量才可以，请各位大神指点
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车到山前必有路。。。
1楼 2018-11-21 13:51:13
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张小小Y

新虫 (小有名气)
200-250g就可以了吧

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2楼2018-11-21 16:42:07
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张小小Y

新虫 (小有名气)
至接种的细胞密度要看你的细胞状态吧，状态不好多接点状态好少接点，贴壁细胞接种很少计数传代吧，目测细胞能占30%的细胞密度应该可以吧，很久不做贴壁了，仅供参考

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3楼2018-11-21 16:45:27
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shengji

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 张小小Y at 2018-11-21 16:42:07
200-250g就可以了吧

您好，200g离心多长时间？
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车到山前必有路。。。
4楼2018-11-22 15:23:13
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张小小Y

新虫 (小有名气)
5分钟就可以吧

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5楼2018-11-22 15:34:09
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shengji

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 张小小Y at 2018-11-22 15:34:09
5分钟就可以吧

您好，你是养这种细胞吧，我第一次养，这种细胞在高倍镜下看是什么样的？我T25培养瓶，换液后，培养一天感觉细胞数量没怎么变化，而培养基颜色已变浅，在低倍镜下看细胞状态很正常，只是没长满，高倍镜下不知细胞是什么样的，您有高倍镜下的细胞图片吗？我怀疑是不是染菌导致细胞不长，高倍镜下看细胞不是那种梭型的，不知什么样的才是正常状态，我想参考一下。
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车到山前必有路。。。
6楼2018-11-22 16:39:53
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张小小Y

新虫 (小有名气)
我现在都是做悬浮的了，你可以去ATCC上看看细胞形态，如果是你说的状态，有可能是支原体感染，你可以具体的查阅一下支原体感染的具体状态看看跟你的是否符合

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7楼2018-11-22 18:13:00
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shengji

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 张小小Y at 2018-11-22 18:13:00
我现在都是做悬浮的了，你可以去ATCC上看看细胞形态，如果是你说的状态，有可能是支原体感染，你可以具体的查阅一下支原体感染的具体状态看看跟你的是否符合

好的，谢谢
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车到山前必有路。。。
8楼2018-11-23 10:54:05
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shengji

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 张小小Y at 2018-11-22 18:13:00
我现在都是做悬浮的了，你可以去ATCC上看看细胞形态，如果是你说的状态，有可能是支原体感染，你可以具体的查阅一下支原体感染的具体状态看看跟你的是否符合

您好，支原体感染后培养基会变浑浊吗？我的培养基很澄清
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车到山前必有路。。。
9楼2018-11-23 11:02:29
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harmonywen

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
支原体不会导致培养浑浊，细菌污染才会引起浑浊。而且支原体肉眼是看不到的，只能用PCR检测，或者染DAPI检测。
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10楼2018-11-23 12:14:15
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