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小lu_轩儿

新虫 (小有名气)

[求助] ans测蛋白表面疏水性 ans的溶解问题 已有2人参与

请问大家测蛋白质的表面疏水性用的是ans铵盐么?pbs溶解性怎么样?测得时候需要注意什么么?

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罡罡学

新虫 (小有名气)

我做过一次,ANS用PBS溶解的,不过ANS在测的时候,放置时间越长,荧光值会降低。灵敏度可以不按照文献上的,灵敏度越高,荧光值越大。我测蛋白时这样做的,可能方法也不太一样。

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2楼2018-11-21 10:51:48
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小lu_轩儿

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 罡罡学 at 2018-11-21 10:51:48
我做过一次,ANS用PBS溶解的,不过ANS在测的时候,放置时间越长,荧光值会降低。灵敏度可以不按照文献上的,灵敏度越高,荧光值越大。我测蛋白时这样做的,可能方法也不太一样。
...

那请问您用的是铵盐 还是钠盐 还是就是酸呀?

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3楼2018-11-21 11:06:50
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时辰猫

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by 罡罡学 at 2018-11-21 10:51:48
我做过一次,ANS用PBS溶解的,不过ANS在测的时候,放置时间越长,荧光值会降低。灵敏度可以不按照文献上的,灵敏度越高,荧光值越大。我测蛋白时这样做的,可能方法也不太一样。
...

大神您好~
请问你是用什么软件做初始斜率的啊?怎么做的呢?
还有就是蛋白质浓度为0.12mg/ml时荧光强度为23006这个正常吗?
谢谢大神!

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4楼2018-11-27 20:04:52
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罡罡学

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by 时辰猫 at 2018-11-27 20:04:52
大神您好~
请问你是用什么软件做初始斜率的啊?怎么做的呢?
还有就是蛋白质浓度为0.12mg/ml时荧光强度为23006这个正常吗?
谢谢大神!
...

可能方法不同,我用的方法是稀释成不同浓度的蛋白溶液,测出每个浓度的荧光值,浓度为横坐标,荧光值为纵坐标,它的斜率就为样品的荧光值。

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5楼2018-11-27 22:03:45
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时辰猫

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 罡罡学 at 2018-11-27 22:03:45
可能方法不同,我用的方法是稀释成不同浓度的蛋白溶液,测出每个浓度的荧光值,浓度为横坐标,荧光值为纵坐标,它的斜率就为样品的荧光值。
...

我也是这么做的,但是用Excel做出来斜率特别大。请问你可以稍微帮我看一眼数据吗?我怕我做错了

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6楼2018-11-28 00:00:44
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罡罡学

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 时辰猫 at 2018-11-28 00:00:44
我也是这么做的,但是用Excel做出来斜率特别大。请问你可以稍微帮我看一眼数据吗?我怕我做错了
...

可能是你的灵敏度太大了吧

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7楼2018-11-28 00:02:48
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ZYW1004

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 罡罡学 at 2018-11-21 10:51:48
我做过一次,ANS用PBS溶解的,不过ANS在测的时候,放置时间越长,荧光值会降低。灵敏度可以不按照文献上的,灵敏度越高,荧光值越大。我测蛋白时这样做的,可能方法也不太一样。
...

你好,请问你的ANS溶液和PBS浓度是多少啊,我的ANS在PBS里溶解不了
8楼2022-08-03 10:59:45
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