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tianhua木虫 (正式写手)
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[交流]
请教一个梯度程序的理解问题!
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各位前辈: 请问下这个梯度条件: HPLC色谱方法:流动相A为0.2%磷酸水溶液,流动相B为0.2%磷酸甲醇溶液,梯度条件为: 1 :0min, A:B=80:20(V /v) 2 :30min, A:B=60:40(V /v) 3:37min ,A:B=52:48(V /v) 4:47 min, A:B=52:48(V /v) 5: 55 min, A:B=0:100(V /v) 6:60min, A:B=80:20(V /v) 7:70min,stop 我的问题有: 1 为什么要在第3与4个时间点设一个等度洗脱呢?为什么不直接设成以下这个梯度程序呢? 1 :0min, A:B=80:20(V /v) 2 :30min, A:B=60:40(V /v) 3:37min ,A:B=52:48(V /v) 4: 55 min, A:B=0:100(V /v) 5:60min, A:B=80:20(V /v) 6:70min,stop 2 第60min, A:B=80:20(V /v),是为了平衡柱子吗? 第三个问题:就在在进样前,一般要让梯度程序走一下空白,请问这个空白是指不进样,但仍让液相完整的走完一个梯度程序吗?(比如上面的是70min)? 盼指教,谢谢 [ Last edited by tianhua on 2009-4-24 at 22:38 ] |
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