应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 【求助】PVDF膜的本底问题
51/1返回列表
查看: 1153  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
【有奖交流】积极回复本帖子，参与交流，就有机会分得作者 wdwd123 的 8 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

wdwd123

铁杆木虫 (知名作家)

[交流] 【求助】PVDF膜的本底问题

各位大哥大姐，谁用过PVDF膜呀？我做的是抗体膜芯片，我用5%的脱脂牛奶封闭，常温下2-3个小时或4度过夜，还有很高的本底。
    大家做western-blotting的时候也用PVDF膜呀，好像文献上说封闭效果都很好啊，为什么我那样做就不行呢？
    我是这样做的，先用5%牛奶封闭，然后点二抗上去，TBST洗后，再加底物，结果却显色了，按理说，不该显色啊。
    等等，中间有很多问题，希望大家给点建议。
    如果有同行，我们交流下：506932097
      也希望做western的朋友们给点建议。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-04-24 21:27:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

meizhou

木虫 (知名作家)

沉墨于心，不没于物
因为你的抗原无法吸附固定到膜上，实验确实有些复杂，这样设计也确实存在很多问题。我建议你再琢磨琢磨是否使用三抗酶标，思路还得再换换。
赞一下 回复此楼
《memory》---BarbaraStreisand
8楼2009-05-20 17:18:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

missyouwq

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
wdwd123(金币+5,VIP+0):谢谢 4-25 17:01
我不懂，但是帮你顶顶帖子，看你挺着急的
赞一下(6人) 回复此楼
锲而不舍，天道酬勤
2楼2009-04-25 13:38:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

meizhou

木虫 (知名作家)

沉墨于心，不没于物
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wdwd123(金币+10,VIP+0):谢谢 4-25 17:00
跟显色方法有关系,如果你用DAB反应时间稍长本底就重.ECL溶液如果不太合适，或者过期可能会出现这种情况.当然,也不确定你的膜效果怎样,我们用minipore的5%的脱脂牛奶封闭常温一个小时就不会出现本底，TBST漂洗三次/5分钟就能洗得干净。

[ Last edited by meizhou on 2009-4-25 at 16:41 ]
赞一下(10人) 回复此楼
《memory》---BarbaraStreisand
3楼2009-04-25 16:34:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

meizhou

木虫 (知名作家)

沉墨于心，不没于物
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
wdwd123(金币+10,VIP+0): 4-25 17:00
你的意思是说你没加一抗，结果却显色了？
卖糕的！是不是操作过程中你的膜被污染了？
建议你换用minipore，伯乐或者roche的膜试试看，我们从没从过假阳性这种情况。
当然，提醒你漂洗时TBST溶液尽量多一些，时间可以延长。其实封闭45分钟基本就够，如果脱脂奶没问题的话。
赞一下(8人) 回复此楼
《memory》---BarbaraStreisand
4楼2009-04-25 16:39:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 3/150 2026-08-30 02:22 by ZPa0EcMwuECS
[博后之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 6/300 2026-08-30 01:36 by ZPa0EcMwuECS
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-30 01:03 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +16 爱看书的可乐 2026-08-26 18/900 2026-08-30 00:59 by winsaint
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 7/350 2026-08-30 00:52 by ZPa0EcMwuECS
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 5/250 2026-08-30 00:41 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 国社科申报系统有变化 +3 kynobel 2026-08-23 3/150 2026-08-29 21:57 by 余韵清
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +4 tannykie 2026-08-29 4/200 2026-08-29 17:14 by lmz0216
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +5 gdd2018 2026-08-28 10/500 2026-08-29 14:10 by Jacob678
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金不中，共勉 +11 eulota 2026-08-26 11/550 2026-08-28 14:22 by 火星超人xi
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜？ 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 今天务委会开完了，明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭