24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (3280)
>虫友互识 (848)
>文献求助 (235)
>导师招生 (162)
>休闲灌水 (159)
>考博 (131)
>教师之家 (86)
>博后之家 (81)
>硕博家园 (80)
>找工作 (77)
>论文投稿 (75)
>论文道贺祈福 (67)
>基金申请 (65)
>考研 (57)
>公派出国 (51)
>招聘信息布告栏 (36)

返回列表

当前主题已经存档。

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

bioscience

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 8808.1
红花: 1
帖子: 944
在线: 123.9小时
虫号: 285191
注册: 2006-10-14
专业: 生殖生物学

[交流] 求助 HE染色的问题

心脏HE染色，细胞质总是染得很深，显微镜下呈深紫红色，而且细胞间边界不清楚，感觉沾着很多曙红染料颗粒的样子。
现在只在曙红中沾一下就拿出来，但没有用处。试图在苏木精染色后调整盐酸酒精分色的时间，但时间短了没有用，时间长了细胞核的颜色就都没了。
不知哪位遇到过类似情况，如何解决？

回复此楼

» 猜你喜欢

1楼 2009-04-24 21:17:25

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

savid888

木虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 3503.2
散金: 127
帖子: 392
在线: 385.7小时
虫号: 62240
注册: 2005-03-15
性别: GG
专业: 组织工程学

呵呵，是的，别人都怕染不上（其原因多半是伊红染色后酒精脱水把伊红的颜色也褪了），你却抱怨染的太深
伊红有醇溶性的和水溶性的。实在不行的话就换种试试吧。

赞一下

回复此楼

4楼2009-04-25 16:12:46

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 4 个回答

savid888

木虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 3503.2
散金: 127
帖子: 392
在线: 385.7小时
虫号: 62240
注册: 2005-03-15
性别: GG
专业: 组织工程学

★ ★ ★ ★ ★
reasonspare(金币+5,VIP+0):积极分享奖 4-25 00:56

这是非常正常的现象，开始做HE染色的时候都会碰到。
盐酸酒精分色是HE染色的关键步骤，染出的片子核浆边界是否清晰取决于分色的度，过则苏木精褪色太重，核浆边界不清晰；不足则达不到分色的目的。
建议：1. 盐酸酒精分色后在自来水中返蓝时间延长，或用稀氨水返蓝；2. 伊红可以过滤后使用，这样应该不会“感觉沾着很多曙红染料颗粒的样子”，并且伊红染色不需要太浓，只要最终封片时有淡淡的红色就可以了，这样的片子反而好看些。
个人愚见，请斟酌。

赞一下(10人)

回复此楼

2楼2009-04-24 23:29:03

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

bioscience

铁杆木虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 8808.1
红花: 1
帖子: 944
在线: 123.9小时
虫号: 285191
注册: 2006-10-14
专业: 生殖生物学

谢谢建议
我采取的是0.25%氨水返蓝20s.
伊红原来采用的是0.5%浓度，后来觉得太浓，又稀释了四倍，染色时间1s.但细胞质仍然染得很深，封片时看组织就是很浓的红色。不过伊红的确没有过滤，我过滤后再试试看。
我就这个问题曾经和别的实验室的人交流过，但似乎没什么人遇到这个问题。在网上查找，好像也是抱怨细胞质染不上的，很少有说染得太深。

赞一下

回复此楼

3楼2009-04-25 13:03:15

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

查看全部 4 个回答