24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2754  |  回复: 6
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

沫子大大

新虫 (小有名气)

[求助] his标签蛋白纯化后有沉淀已有1人参与

用不同浓度de咪唑洗脱的,从50mM开始出现沉淀,当时洗脱的时候没有,放冰箱一夜就出现沉淀了,是什么原因

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fuyuandj86

版主 (著名写手)

己所不欲,勿施于人

不要在咪唑溶液中长期保存蛋白,洗脱后把蛋白换到无咪唑的缓冲液中,混入少量甘油后,用液氮速冻,-80C保存

发自小木虫IOS客户端
The doer of good becomes good, the doer of evil becomes evil.
3楼2018-11-16 00:02:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

匿名

本帖仅楼主可见
2楼2018-11-15 15:32:02
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

bio转录组

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
(1)出现浑浊,说明蛋白处在不稳定的环境中或者自身就不稳定,所以要检查缓冲体系是否正确,环境是否低温,或在缓冲液中加入还原剂DTT。
(2)加入肌氨酸钠,迅速使蛋白变性,消除浑浊现象。
生活活生生累死
4楼2018-11-16 08:51:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沫子大大

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 龙腾92 at 2018-11-15 15:32:02
你用的ph值是多少?可能ph太接近等电点了,升高一点ph值就不会了,

谢谢,后来我立马把咪唑洗脱掉就好了

发自小木虫IOS客户端
5楼2018-11-28 20:45:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见