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dapaosheng木虫 (著名写手)
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| 有没有人做过毕亦酵母的表达，我插入的外源基因在培养基上清中没有表达，是什么原因呢，应该怎样解决呢？ |
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2楼2009-04-24 00:15:45
jiaminl
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3楼2009-04-24 07:50:47
4楼2009-04-24 08:07:18
5楼2009-04-24 08:23:26
6楼2009-04-24 08:24:44
axi8383
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7楼2009-04-24 08:43:59
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木虫 (著名写手)
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dapaosheng(金币+8,VIP+0):谢谢你的建议，挺详细的，我会好好试一下的 4-24 12:55
dapaosheng(金币+8,VIP+0):谢谢你的建议，挺详细的，我会好好试一下的 4-24 12:55
| 你首先要确定你用的载体有没有问题，如果没有问题的话，你就要看一下你插入的片段有没有改变载体原有的阅读框，如果这些都没有问题的话，那可能是你的培养条件和诱导条件没有摸好吧，或者你也可以试一下换一种酶来做线性化，然后再转化一次，这可能也是有一点影响的，其实上清中没有表达也不是什么奇怪的事，因为也有可能跟你插入的片段的大小和碱基组成有关的，你也可以试一下把酵母破碎了，然后跑一下SDS-PAGE看有没有你的目的蛋白，如果有的话就说明是有表达的，只是不能分泌到上清而已 |
8楼2009-04-24 10:24:34