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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 求助：很奇怪TLC检测为什么和HPLC不一致呢？
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lj123808

铜虫 (小有名气)

[交流] 求助：很奇怪TLC检测为什么和HPLC不一致呢？

请问各位有没有遇到过这样的情况：有A和B两种物质，
TLC检测时在254nmUV条件下，B有很强的吸收，可是A几乎看不到，
可是在HPLC检测时254nmUV检测器下，却是A的吸收很强，B的几乎没有，
而且我也确定A和B的出峰位置没有颠倒，不知道是怎么回事啊，
真是郁闷啊，不知道以哪个检测为准 恳请各位指教！
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1楼 2009-04-23 14:46:05
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llp199005

木虫 (正式写手)
不懂，期待楼下解答
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没有永恒的真理，也没有永恒的谬误。
2楼2009-04-23 14:49:14
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lj123808

铜虫 (小有名气)
★ ★
opq691(金币+2):thanks
一般情况这两种应该是一致的对吧  应该是TLC上吸收强的HPLC上的峰面积会很高的吧
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3楼2009-04-23 14:54:10
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abc1def

银虫 (初入文坛)
★ ★
opq691(金币+2):thanks
首先，你确定在HPLC上你用的是什么柱子，流动相和薄层的洗脱上用的是否一致，液相上常用的c18柱是反相柱，可以从液相分离的原理思考这个问题。
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北京，药品研发，项目管理及注册
4楼2009-04-23 15:02:22
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lj123808

铜虫 (小有名气)
可以具体一点吗？液相分离的原理？是说反相柱的极性原理一般与TLC的极性相反吗？ 恩如果是说AB的出峰时间这个我用A的单一物质跑过HPLC，所以确定它们没颠倒，如果不是这个原因，还请指教一下，怎么用液相分离的原理考虑呢？
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5楼2009-04-23 15:11:32
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嘉木

金虫 (正式写手)
★ ★
opq691(金币+2):thanks
TLC一般是正相的，HPLC一般是反相的，出峰时间会不同
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6楼2009-04-23 15:52:47
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Doww

★ ★
opq691(金币+2):thanks
同意楼上意见，反相的TLC，很贵的，一般人用不起。
硅胶TLC是正相，和反相HPLC的顺序正好相反。
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7楼2009-04-23 16:40:22
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)
★
lj123808(金币+1,VIP+0):谢谢 4-23 19:31
LZ是不是把顺序搞反了啊  
TLC泡在前面的斑点在HPLC上时候出峰哦
正反向是相反的哦
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8楼2009-04-23 16:43:04
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
opq691(金币+2):thanks
TLC泡在前面的斑点在HPLC上是后出峰哦
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9楼2009-04-23 16:43:30
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lj123808

铜虫 (小有名气)
谢谢大家的热心帮忙，我用A的对照品跑过HPLC，可是它出峰实在3.5min(后面也再没有峰了)但是A的TLC也是跑的快的就是靠近前沿的，所以实在是很奇怪，不知道是不是柱子有问题。


大家这么热心，很想追加发放金币，可是找了半天都没有找到，最后点了一个之后说是我没有权限，所以就选择给了8楼，因为我一直往下看，看到这楼的时候突然想到了一个新的实验，但还是谢谢各位的热心帮助！！
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10楼2009-04-23 19:38:34
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