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lj123808

铜虫 (小有名气)

[交流] 求助:很奇怪TLC检测为什么和HPLC不一致呢?

请问各位有没有遇到过这样的情况:有A和B两种物质,
TLC检测时在254nmUV条件下,B有很强的吸收,可是A几乎看不到,
可是在HPLC检测时254nmUV检测器下,却是A的吸收很强,B的几乎没有,
而且我也确定A和B的出峰位置没有颠倒,不知道是怎么回事啊,
真是郁闷啊,不知道以哪个检测为准 恳请各位指教!
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llp199005

木虫 (正式写手)

不懂,期待楼下解答
没有永恒的真理,也没有永恒的谬误。
2楼2009-04-23 14:49:14
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lj123808

铜虫 (小有名气)

★ ★
opq691(金币+2):thanks
一般情况这两种应该是一致的对吧  应该是TLC上吸收强的HPLC上的峰面积会很高的吧
3楼2009-04-23 14:54:10
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abc1def

银虫 (初入文坛)

★ ★
opq691(金币+2):thanks
首先,你确定在HPLC上你用的是什么柱子,流动相和薄层的洗脱上用的是否一致,液相上常用的c18柱是反相柱,可以从液相分离的原理思考这个问题。
北京,药品研发,项目管理及注册
4楼2009-04-23 15:02:22
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lj123808

铜虫 (小有名气)

可以具体一点吗?液相分离的原理?是说反相柱的极性原理一般与TLC的极性相反吗? 恩如果是说AB的出峰时间这个我用A的单一物质跑过HPLC,所以确定它们没颠倒,如果不是这个原因,还请指教一下,怎么用液相分离的原理考虑呢?
5楼2009-04-23 15:11:32
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嘉木

金虫 (正式写手)

★ ★
opq691(金币+2):thanks
TLC一般是正相的,HPLC一般是反相的,出峰时间会不同
6楼2009-04-23 15:52:47
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Doww

★ ★
opq691(金币+2):thanks
同意楼上意见,反相的TLC,很贵的,一般人用不起。
硅胶TLC是正相,和反相HPLC的顺序正好相反。
7楼2009-04-23 16:40:22
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)


lj123808(金币+1,VIP+0):谢谢 4-23 19:31
LZ是不是把顺序搞反了啊  
TLC泡在前面的斑点在HPLC上时候出峰哦
正反向是相反的哦
8楼2009-04-23 16:43:04
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
opq691(金币+2):thanks
TLC泡在前面的斑点在HPLC上是后出峰哦
9楼2009-04-23 16:43:30
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lj123808

铜虫 (小有名气)

谢谢大家的热心帮忙,我用A的对照品跑过HPLC,可是它出峰实在3.5min(后面也再没有峰了)但是A的TLC也是跑的快的就是靠近前沿的,所以实在是很奇怪,不知道是不是柱子有问题。


大家这么热心,很想追加发放金币,可是找了半天都没有找到,最后点了一个之后说是我没有权限,所以就选择给了8楼,因为我一直往下看,看到这楼的时候突然想到了一个新的实验,但还是谢谢各位的热心帮助!!
10楼2009-04-23 19:38:34
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