24小时热门版块排行榜    

查看: 2209  |  回复: 7
当前主题已经存档。

xhlxhl

木虫 (正式写手)

[交流] RNase A 如何使用

QIAGEN 的 RNase A
规格: 2.5 ml (100 mg/ml)
活性: 7000 units/ml
单位定义: 一个单位定义为在25°C、pH 5.0的条件下,催化水解RNA的一级反应速度常数为1.0时的RNase量


我提的基因组,有RNA 污染,测得DNA含量1ug/ul,体积 200ul,如何使用RNase A ,加的量和什么温度培养多长时间。
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

轻5飞扬

金虫 (正式写手)


xhlxhl(金币+1,VIP+0):谢谢热心的小虫虫 4-23 00:38
我们平时用的RNase A的工作浓度是20微克/ML? 记不太清楚了,总之母液要配成20mg/mL,用的时候1:1000加就OK,配完后要在开水里面煮十分钟去去除DNA酶,然后-20度保存就行了,用的时候1:1000加到你的DNA或是质粒中,37度处理大约两个小时RNA消化的情况就比较理想
2楼2009-04-22 23:07:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

695

木虫 (职业作家)

谢谢指点
3楼2009-04-23 00:44:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Sarah_Shy

木虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极分享奖 4-25 00:54
其实用法没那么严格,我最近也用RNase A消化提取的DNA中的RNA。我用的酶和你一个浓度,我每次加1ul,消化1h左右,效果都很好的啊
4楼2009-04-24 23:50:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

humants

金虫 (正式写手)

我都是质粒提取完之后,加1微升 10min搞定
5楼2009-04-25 09:24:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷


xhlxhl(金币+1,VIP+0):谢谢分享哦~~ 4-28 23:23
RNase中有迹量的DNase,使用前不处理的话,容易将基因组DNA切得乱七八糟(怎么个乱七八糟法没试验过),分子克隆上的配法是:将RNase A溶于10mmol/LTris cl(PH7.5),15mmol/L NaCl中,配成10mg/mL的浓度,于沸水中加热15min,缓慢冷却到室温,分装小份-20℃保存。
我处理的时候50ul基因组DNA(OD260/OD280=1.6~1.8)2ul 37℃处理1h效果就很好。
Thank-you,so-blue.
6楼2009-04-25 10:22:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

songfenzz

银虫 (小有名气)

帮楼主顶一下,呵呵!向高手学习。。。
多谢交流~~共同进步!
7楼2009-04-27 22:20:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bbyu007

木虫 (正式写手)

按照RNase A那个小盒子里里的说明书,煮一下,然后1:100倍加,即可,37℃消化1小时,效果很好的
我是笨笨鱼~~~
8楼2009-04-28 08:34:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xhlxhl 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 机械学硕总分317求调剂!!!! +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 材料与化工 322求调剂 +6 然11 2026-03-19 6/300 2026-03-25 18:37 by haxia
[考研] 081700 调剂 267分 +10 迷人的哈哈 2026-03-23 10/500 2026-03-25 12:12 by userper
[考研] 281求调剂 +4 Koxui 2026-03-24 5/250 2026-03-25 11:38 by userper
[考研] 289求调剂 +9 怀瑾握瑜l 2026-03-20 9/450 2026-03-25 11:02 by userper
[考研] 086003食品工程求调剂 +6 淼淼111 2026-03-24 6/300 2026-03-25 10:29 by 3Strings
[考研] 0703化学求调剂 +6 奶油草莓. 2026-03-22 7/350 2026-03-25 10:00 by shangxh
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 食品专硕 一志愿双一流 328 +3 xiaom99 2026-03-21 4/200 2026-03-24 21:20 by lailaisimei
[考研] 材料调剂 +6 匹克i 2026-03-23 6/300 2026-03-24 21:09 by greychen00
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +7 holy J 2026-03-21 7/350 2026-03-24 17:24 by xiaohai104
[考研] 070300化学求调剂 +9 苑豆豆 2026-03-20 9/450 2026-03-24 17:15 by licg0208
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +9 材料学257求调剂 2026-03-23 10/500 2026-03-24 07:36 by wangy0907
[考研] 276求调剂 +3 YNRYG 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:31 by 醉在风里
[考研] 298求调剂一志愿211 +3 上岸6666@ 2026-03-20 3/150 2026-03-22 15:50 by ColorlessPI
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 353求调剂 +3 拉钩不许变 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:56 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见