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liuxhon

铁虫 (初入文坛)

[交流] 求助:很蹊跷,关于HPLC检测恩诺沙星,各位帮忙分析下

请教各位:

我用日立L2000的液相分析恩诺沙星,遇到一个很蹊跷的情况:无论样品浓度高低(标准品或原药),最后只会出现一个巨大的秃顶的峰(峰高800左右,不同浓度样品的出峰时间、峰高均相同,哪怕浓度相差10倍)。检测条件如下,流动相:0.017M四丁基溴化铵(磷酸调pH3.0左右)/乙腈=88/12,或者是0.01M磷酸缓冲盐(三乙胺调pH3.0左右))/乙腈=88/12;荧光检测器,激发波长278nm,发散波长460nm;250*4.6mmC18柱,流速1.0
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如沨

木虫 (职业作家)

囧囧有神


liuxhon(金币+1,VIP+0):不错 4-23 00:13
是平头峰吗?平头峰一般是进样量大或者浓度大的问题,你的浓度是不是很大呀?要不也可以试一下其他的样看看
静坐常思己——过;闲谈莫论人——非!
2楼2009-04-22 16:23:23
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yangyue9876

木虫 (著名写手)


liuxhon(金币+1,VIP+0):谢谢 4-23 00:14
可能与浓度有关.
另外,氟喹诺酮类药物可以用UV检测器,你看一下,如果你的HPLC有该检测器。
还有就是参考一下中国药典或者中国兽药典关于恩诺沙星的HPLC检测方法,特别是储备液的配置与稀释。
3楼2009-04-22 16:58:12
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liuxhon

铁虫 (初入文坛)

是平头峰,但样品浓度并不大,0.1-1ppm,不管什么浓度总是出现高度800的平头峰,丁香园的有战友讲可能是化学工作站检测限低了,不知道是不是这个原因。日立L2000的液相我也是头一次用,不知道方法设置有没有问题。
4楼2009-04-23 00:13:03
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snowmail2000

金虫 (小有名气)


opq691(金币+1,VIP+0):thanks 4-23 18:59
平头峰通常都是浓度过大,你只是稀释了10倍。你稀释1000倍试试,还会有类似情况么?
沈阳药科大学药学院
5楼2009-04-23 17:46:51
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yugui0624

木虫 (小有名气)

一般我在工作中遇到的平头峰都是因浓度过大造成的,浓度相差十倍根本反应不了问题,非常同意楼上的建议,你再把浓度继续稀释看看问题是不是能够解决?
6楼2009-04-23 19:32:36
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liuxhon

铁虫 (初入文坛)

我以前用安捷伦1100做过恩诺沙星,0.1ppm已经是比较小的了,如果这样的浓度也算是过大的话,那就没法测了,正常的检测范围应该在5-0.005ppm之间。
7楼2009-04-24 11:31:25
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