24小时热门版块排行榜    

查看: 2358  |  回复: 15
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

GinTonic

金虫 (小有名气)

[交流] pet-28a两端的his-tag总共多大啊

最近将一225bp的目的基因插入到了pet-28a中,诱导表达后在page胶上看不出明显的目的条带,用一抗为抗his标签的抗体做western检测,有条带但是在17kd的上方,我的目的基因表达出来应该是7.5kd,我读了质粒图谱,觉得两端得到his加起来也就4.5kd,因此我的融合蛋白应该在17以下才对,真是晕了现在,我看文献里说pet-32a的his共有14kd左右,这两个是不同的载体,不知道我的pet-28a的his-tag表达后是多大啊?
哪位虫虫能帮帮我啊 急死了啊
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hongkaichen

金虫 (小有名气)

我觉的这个就是你的目的蛋白,不过如果跑PAGE胶看不到的话,那么可能是你的蛋白表达量比较小。
7楼2009-04-22 19:15:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

yuhuimeiye

木虫 (著名写手)

28的标签很小,28的比32的明显小很多。28和原蛋白大小相比大不了多少。
2楼2009-04-22 01:07:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dnaxxx

至尊木虫 (小有名气)


GinTonic(金币+1,VIP+0):文章很好啊 很有借鉴意义啊 我准备去测序看看 4-22 14:18
据说带有his tag标签的蛋白表观分子量会比实际分子量大,
可以参阅“SDS-PAPGE法测定His-tag融合蛋白分子量产生偏差的原因”这篇文献,可以从CNKI下载。
3楼2009-04-22 08:01:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑罕

金虫 (小有名气)

GST大约为26KD
his标签很小,融合蛋白和原蛋白大小相比大不了多少
4楼2009-04-22 09:10:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿 西北大学 总分282 英语一62 求调剂 +3 18419759900 2026-03-25 3/150 2026-03-25 23:20 by peike
[考研] 316求调剂 +9 梁茜雯 2026-03-19 9/450 2026-03-25 23:01 by peike
[考研] 求调剂 +3 QiMing7 2026-03-25 3/150 2026-03-25 21:13 by 给你你注意休息
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
[考研] 考研一志愿苏州大学初始315(英一)求调剂 +3 sbdksD 2026-03-24 4/200 2026-03-25 18:16 by xcjcqu
[考研] 材料277求调剂 +4 min3 2026-03-24 4/200 2026-03-25 15:29 by fch1983
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +4 13831862839 2026-03-24 5/250 2026-03-25 09:47 by 无际的草原
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] 材料292调剂 +8 橘颂思美人 2026-03-23 8/400 2026-03-24 16:33 by laoshidan
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 生物学一志愿985,分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪!?!
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
信息提示
请填处理意见