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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 如何定义某种细菌生长状态的好坏
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王雨云

金虫 (小有名气)

[交流] 如何定义某种细菌生长状态的好坏

请问哪位知道如何判别某种细菌生长状态的好坏？筛选某种细菌时，一般不都要找该细菌的最适合生长温度和PH等因素吗？我看过的文献只是说在不同的温度梯度下看该细菌生长状态，从而选出生长好的菌株再做后面的试验，但没有说明怎样的状态叫生长较好。我筛选的细菌主要是让其高产纤维素酶，这里面就存在几种最适合温度和PH的测定问题。1菌株生长最适合温度和PH  2产酶最适合温度和PH  3酶促反应最适合温度和PH，第一步的最适合温度和PH不知道怎么确定，望大侠指教，不胜感激
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1楼 2009-04-21 08:33:21
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者
测OD600nm 不行吗？
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
2楼2009-04-21 09:13:49
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王雨云

金虫 (小有名气)
这个跟菌株生长最适合温度不一样，我自己的理解是用牙签点种看菌落生长大小来确定其长势，或者用打孔器挖快接种看菌落生长大小。测OD值是看酶活力的高低，我现在已经筛选到产酶菌株，目前要找到它的1菌株生长最适合温度和PH  2产酶最适合温度和PH  3酶促反应最适合温度和PH，最终目的还是提高酶活力不知道还有没有什么方法来测菌株生长最适合温度和PH ，不知道是做这个的人太少还是做这个测试没意义，我看得文章很少有测这方面的，一般就是测2产酶最适合温度和PH  3酶促反应最适合温度和PH
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3楼2009-04-21 11:30:48
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elvias

铁杆木虫 (正式写手)
细菌没做过，不过细胞可以看集落数和测生长曲线来确定。其实比较简单了。
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4楼2009-04-21 16:01:37
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lifefamily

OD600是定菌液浓度的吧……
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5楼2009-04-21 16:48:36
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dfggc

荣誉版主 (著名写手)
specific growth rate
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To be, or not to be, that's a problem.
6楼2009-04-21 18:58:02
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王雨云

金虫 (小有名气)
请教测生长曲线怎么具体操作，是每天测其OD值，再根据OD值做生长曲线吗？
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7楼2009-04-21 21:10:35
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zhmy26

金虫 (正式写手)
OD600就是菌体的吸光值。在〈1的情况下，菌体的个数和OD值呈线性关系。你也可以测定菌体干重，也就是离心后烘干至恒重。这样就可以建立OD和细胞干重的关系式。
至于纤维素酶活性的测定，应该都存在有标准的测定方法，不过可能工作量就是大了一些。根据单位时间酶解获得的葡萄糖克数来确定酶活性高低。至于其他，你的问题太含糊，无法做出准确地回答。抱歉。
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8楼2009-04-22 10:42:11
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zhmy26

金虫 (正式写手)
如果想要减少工作量，获取最优条件需要进行一定的科学实验设计，可以使用全因素实验设计，如果你只需要考虑pH，温度两个条件的话，可以直接进行，应该非常简单。然后测定酶活性，菌体生长量，这两个响应，获取最优化条件即可。比较全面的实验设计方面的知识，你可以上发酵人论坛上逛逛。
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9楼2009-04-22 10:46:48
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飞侠8683

新虫 (小有名气)
可以参考文献在不同温度、pH组合，测定不同培养时间取样测菌体的生长浓度、酶活。
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10楼2009-04-22 11:36:12
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