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王雨云

金虫 (小有名气)

感谢所有楼上的回答,大家说的都是针对于液体发酵培养基中如何确定最适合产酶温度和PH,这些方法我也知道了,我不做发酵这一块,而且我的菌株的原始酶活我都已经测出来了,比较高。目前我在做平板培养,想找出菌株的生长最适合温度和PH 。 简言之,目前就是是想尽可能地提高原始酶活,然后在克隆基因,最后在工程菌中表达,因为通过工程菌表达其酶活还会大幅度提高。
11楼2009-04-22 14:53:35
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王雨云

金虫 (小有名气)

平板培养似乎不适合用这些方法,通过OD值绘生长曲线也是测微生物生长量的一种方法,我查得到还有很多方法,比如:体积测量法,称干重法,比浊法(根据OD值绘生长曲线)
12楼2009-04-22 15:55:55
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zhmy26

金虫 (正式写手)

楼主把问题看得太简单了吧。我不知道你筛选的菌株是细菌还是真菌。如果是真菌,那么纤维素酶只存在三种组分,也就是三个基因。如果是细菌,我所知道的是到现在为止还没有彻底弄清楚它的组成,至少有20种以上。而且,并不是说通过基因克隆就可以提高酶活性,除非对酶基因进行随机突变,定点突变,或者是进行定向进化。简单的克隆原始基因,仅仅是改变它表达的宿主菌,就可以提高活性?好像有点天方夜谭了。如果基因工程如此简单,为什么基因工程还仅仅局限于很少的应用呢?另外,我好像不太轻了解如何在平板上去测定菌株的生长状况?从菌斑多少来判断肯定不行,难道看菌斑的大小?
13楼2009-04-24 16:21:25
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王雨云

金虫 (小有名气)

谢谢各位啦,看来我的问题似乎没有意义,一般很少有通过固体培养来确定菌株生长状况的,我就是在别人的论文里看到过这样的方法,但他们都没有具体说怎样叫长得好还是不好,只是说通过平板培养观察菌株生长态势来选择优良菌株。有的人说这种方法得出的结果没有说服力,其实我也觉得。绘生长曲线(测OD值,测菌体干重等)的方法我都是知道的,目前也在做这个......
14楼2009-04-25 08:05:38
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ly888lsp

木虫 (小有名气)

生长最适PH和合成最适PH不一样
15楼2009-04-25 14:05:51
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王雨云

金虫 (小有名气)

也许我的问题意义不大,一般人都不会通过固体培养来确定菌株生长的好坏,我只是在一些文章里看到过别人确实这样做过,有的人说通过前面的方法得出的结论没有说服力,其实我自己也这样觉得,通过OD值绘生长曲线的方法我知道,目前正在做这件事情,当然还有很多方法,只是想看看如果用固体培养来确定菌株生长的好坏应该怎么确定菌株的长势
16楼2009-04-25 15:11:03
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