应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 质粒，单双酶切电泳结果很奇怪？
71/1返回列表
查看: 558  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

04swlcm

金虫 (小有名气)

[交流] 质粒，单双酶切电泳结果很奇怪？

大家好！
    我今天提的质粒（含pMD19-T vector 2700bp+目的基因1500bp，大小应该在4100bp左右，但跑出来条带在3000bp左右,怪了？之前我做过菌落PCR都跑出目的条带了的菌），我晚上根据自己设计的引物的酶切位点进行单（BglII）双（BglII和SphI）Sample Text酶切，结果，单酶切一条带，还稍微比质粒跑快了一点点，大小查不多在3000bp，奇怪！双酶切两条带，一条也在2800bp左右，一条在1300左右，感觉应该是连上了的啊？？
     恳求大家帮我分析一下，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-04-21 00:06:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xmchen1015

银虫 (小有名气)
从你的描述来看，你鉴定质粒大小时应该是用的Marker，Marker是线性的而你的质粒是环形的，所以你的质粒看起来小很多。建议你空载体做对照重新鉴定一下。
赞一下 回复此楼
2楼2009-04-21 16:06:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lifefamily

2楼方法可以一试
赞一下 回复此楼
3楼2009-04-21 16:51:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

04swlcm

金虫 (小有名气)
谢谢啦~
很怪呢，我今天重提了质粒，结果好像又对了呢！送去测序了，等待结果……
赞一下 回复此楼
4楼2009-04-21 23:44:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
测序之前最好鉴定好质粒是百分百重组好的。
建议多提几组（我一般提10组）直接跑质粒比较大小，跑得慢的做双（单）酶切鉴定，或者以质粒为模板做pcr鉴定。
不过T应该很好连，似乎也不用这么麻烦。
赞一下 回复此楼
Thank-you，so-blue.
5楼2009-04-22 08:54:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

20021239

银虫 (小有名气)
我也在做TA连接，跑电泳也不太正常，不过师兄师姐说质粒电泳结果不能反映真实大小，因为是环状而非线性的，最好做酶切后电泳，当然测序是最好的，也是必须的！
赞一下 回复此楼
http://www.jove.com/index/main.stp
6楼2009-04-22 22:58:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

04swlcm

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 20021239 at 2009-4-22 22:58:
我也在做TA连接，跑电泳也不太正常，不过师兄师姐说质粒电泳结果不能反映真实大小，因为是环状而非线性的，最好做酶切后电泳，当然测序是最好的，也是必须的！

呵呵，就是哈，大家一起加油哦！有问题大家一起交流！
赞一下 回复此楼
7楼2009-04-23 00:05:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 04swlcm 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学调剂 ，六级已过，有科研经历 +4 曦熙兮 2026-03-15 4/200 2026-03-15 18:01 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +3 大米饭！ 2026-03-15 3/150 2026-03-15 17:48 by 哈哈哈哈嘿嘿嘿
[考研] 0703化学调剂，求各位老师收留 +7 秋有木北 2026-03-14 7/350 2026-03-15 17:30 by 小物理化学
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy！ 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 267一志愿南京工业大学0817化工求调剂 +5 SUICHILD 2026-03-12 5/250 2026-03-14 14:53 by jean5056
[考研] 理学化学调剂 +3 040517FYfy？ 2026-03-09 3/150 2026-03-14 03:09 by JourneyLucky
[考研] 一志愿郑大070303，338分，求调剂 +4 dadawaf 2026-03-10 5/250 2026-03-14 01:20 by lsw010101
[考研] 环境调剂 +6 晓看天暮看云 2026-03-09 6/300 2026-03-14 01:16 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +3 CUcat 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:25 by JourneyLucky
[考研] b区环境工程求调剂 +4 Maps1 2026-03-10 6/300 2026-03-14 00:23 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +3 Dizzy123@ 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:02 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +5 邱gl 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:37 by JourneyLucky
[考研] ［0860］321分求调剂，ab区皆可 +4 宝贵热 2026-03-13 4/200 2026-03-13 22:01 by 星空星月
[考研] 285学硕求调剂 +6 柴郡猫_ 2026-03-12 6/300 2026-03-13 20:46 by hmn_wj
[考研] 工科调剂 +4 Jiang191123！ 2026-03-11 4/200 2026-03-13 15:15 by Miko19
[考研] 0817化学工程与技术考研312分调剂 +3 T123 tt 2026-03-12 3/150 2026-03-13 10:49 by houyaoxu
[考研] 274求调剂0856材料化工 +12 z2839474511 2026-03-11 13/650 2026-03-13 10:39 by peike
[考研] 化工学硕306求调剂 +9 42838695 2026-03-12 9/450 2026-03-13 10:16 by houyaoxu
[考博] 2026年博士申请 +3 QwQwQW10 2026-03-11 3/150 2026-03-12 17:58 by gxch43
[考研] 求调剂材料专硕293 +6 段_(:з」∠)_ 2026-03-10 6/300 2026-03-10 18:22 by ms629
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭