| 查看: 544 | 回复: 4 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
[交流]
关于硅胶柱和sephades LH-20的问题
|
|||
|
1、过硅胶柱时通过薄层选择洗脱剂，Rf值要相差多少才能在柱子里分开？（我看了几个帖子，一般说是Rf值0.2以上就能分开，我想问的是，比如薄层板上有5个点，点于点之间的Rf值相差要多少才能分开，还是Rf值在0.2以上的在柱子里都能分开？） 2、文献上写“石油醚：醋酸乙酯( 100∶0～50∶50) →氯仿：甲醇( 100∶2～50∶50)梯度洗脱,得到15 个组分( Fr. 1~Fr. 15) 。”这个“100∶0～50∶50“是根据什么设定的，到什么程度要换个梯度？我只知道他刚开始用石油醚洗脱，后面我就不知道要怎么做了。。。 3、上sephades LH-20柱的样品量大概要多少？我的样品在薄层板上的点太多，不能上sephades LH-20，请问要怎么处理？ PS：本人是新手，问题比较多，大家不要见笑！ |
回复此楼» 猜你喜欢
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有5人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有6人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有7人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有6人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有6人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有7人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有4人回复
2楼2009-04-21 10:59:04
pal2004
木虫 (正式写手)
- PhEPI: 1
- 应助: 54 (初中生)
- 金币: 3936.2
- 红花: 4
- 帖子: 808
- 在线: 179.7小时
- 虫号: 192849
- 注册: 2006-02-21
- 专业: 药物化学
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 4-22 23:36
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 4-22 23:36
|
首先要明白，不同物质通过硅胶柱分离，不仅要求在薄层上Rf一般相差0.2以上，还要最好把Rf值控制在0.3以下，如果两个物质的Rf值分别为0.6和0.8，除非你降低洗脱剂的强度，否则肯定无法分开，因为柱子相当于一个多次爬板的状态，Rf越大，洗脱的越快，分离效果越不好。 你待分离的点较多的话，几乎很难找到一个单一条件把它们一一分开，所以要用梯度。 变梯度从极性最小的溶剂（一般石油醚）开始洗脱，开始的时候梯度变得细点，比如100：0、100：1、50：1...到50:50洗脱完，石油醚：醋酸乙酯的极性范围以及不能把柱子上的物质洗脱了，所以要换氯仿：甲醇。 |
3楼2009-04-22 17:24:56
4楼2009-04-23 15:27:16
5楼2009-04-23 15:29:47
10