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请问大佬关于重组质粒假阳性的问题 已有1人参与
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双酶切法切质粒和片段的，质粒两个酶切位点之间原本有连过片段，因此酶切后能够看到一大一小两个片段，大片段切胶回收，因此能保证质粒是切开的。片段也是双酶切，切胶回收。T4连接酶22度连接50分钟，转化bl21感受态细胞。长出来的菌落大概20个左右，挑8个菌做菌液PCR验证，只有两个有条带，其他都是假阳性。请问为什么会有这么高的假阳性率，是哪一步出了问题呢？ 发自小木虫Android客户端 |
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