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懒小虫dcl

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助凝胶柱层析纯化多糖问题已有1人参与

凝胶柱层析G-75分离纯化籽瓜瓤粗多糖,想要得到精多糖,为什么多糖样品加入柱子以后,流速就越来越慢了,这影响结果吗,是不是每个管必须收集一样体积的液体,我使用蒸馏水洗脱的,多糖样品浓度为10mg/ml,我现在不知道我的问题出在哪里。希望懂的人指点一下,多谢!

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一只胡椒

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by MelodieLeo at 2018-11-20 09:22:09
关于分离纯化多糖的文章有很多,你可以下载参考一下。一般的做法就是用凝胶柱洗脱,定体积收集流出液,绘制洗脱图谱,根据图谱将某一组分合并,进一步纯化。关于流速慢,个人感觉应该不影响,因为最终都是按照分子量 ...

大家用硫酸苯酚法绘制洗脱曲线的时候,整个体系 样品、苯酚、浓硫酸的量是多少呀,是用什么仪器进行检测的?我用酶标仪+96孔板+300微升的体系和紫外+试管+3毫升的体系,绘出来的洗脱曲线不太好,和大家文章里的图差别挺大的,可以交流一下吗?
4楼2021-04-14 15:32:52
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MelodieLeo

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

关于分离纯化多糖的文章有很多,你可以下载参考一下。一般的做法就是用凝胶柱洗脱,定体积收集流出液,绘制洗脱图谱,根据图谱将某一组分合并,进一步纯化。关于流速慢,个人感觉应该不影响,因为最终都是按照分子量筛分的。
2楼2018-11-20 09:22:09
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浅谈时光123

新虫 (初入文坛)

1,流速要找到一个合适的流速,上样流速要低于平衡流速。流速过快,胶越压越实,流速自然变慢。 2,流动相选择不合理,多糖极性大,或者水溶性强弱也会造成这种现象。

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3楼2018-12-26 14:40:00
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