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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 碳水化合物 » 求助凝胶柱层析纯化多糖问题
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懒小虫dcl

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助凝胶柱层析纯化多糖问题 已有1人参与

凝胶柱层析G-75分离纯化籽瓜瓤粗多糖，想要得到精多糖，为什么多糖样品加入柱子以后，流速就越来越慢了，这影响结果吗，是不是每个管必须收集一样体积的液体，我使用蒸馏水洗脱的，多糖样品浓度为10mg/ml，我现在不知道我的问题出在哪里。希望懂的人指点一下，多谢！

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1楼 2018-11-12 17:01:21
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MelodieLeo

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

关于分离纯化多糖的文章有很多，你可以下载参考一下。一般的做法就是用凝胶柱洗脱，定体积收集流出液，绘制洗脱图谱，根据图谱将某一组分合并，进一步纯化。关于流速慢，个人感觉应该不影响，因为最终都是按照分子量筛分的。
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2楼2018-11-20 09:22:09
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浅谈时光123

新虫 (初入文坛)
1，流速要找到一个合适的流速，上样流速要低于平衡流速。流速过快，胶越压越实，流速自然变慢。 2，流动相选择不合理，多糖极性大，或者水溶性强弱也会造成这种现象。

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3楼2018-12-26 14:40:00
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一只胡椒

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by MelodieLeo at 2018-11-20 09:22:09
关于分离纯化多糖的文章有很多，你可以下载参考一下。一般的做法就是用凝胶柱洗脱，定体积收集流出液，绘制洗脱图谱，根据图谱将某一组分合并，进一步纯化。关于流速慢，个人感觉应该不影响，因为最终都是按照分子量 ...

大家用硫酸苯酚法绘制洗脱曲线的时候，整个体系 样品、苯酚、浓硫酸的量是多少呀，是用什么仪器进行检测的？我用酶标仪+96孔板+300微升的体系和紫外+试管+3毫升的体系，绘出来的洗脱曲线不太好，和大家文章里的图差别挺大的，可以交流一下吗？
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4楼2021-04-14 15:32:52
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