| 查看: 305 | 回复: 5 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
xiaorong-er金虫 (正式写手)
|
[交流]
询问怎么做未知物种某个已知酶的mRNA表达
|
||
| 我现在想做一个酶的mRNA表达情况，但是这个物种的cDNA序列没有报道，我该怎么做？是不是根据人和鼠的保守区设计引物，挑选合适的引物和退火温度进行PCR扩增，扩增产物测序后根据测序序列进行引物设计，再挑选合适的引物和退火温度进行PCR扩增就可以了？ |
回复此楼» 猜你喜欢
北京林业大学硕导招生广告
已经有4人回复
-
材料调剂
已经有7人回复
-
化学工程085602 305分求调剂
已经有10人回复
-
289求调剂
已经有15人回复
-
291 求调剂
已经有7人回复
-
274求调剂
已经有14人回复
-
309求调剂
已经有5人回复
-
292求调剂
已经有8人回复
-
求调剂
已经有4人回复
-
一志愿 西北大学 总分282 英语一62 求调剂
已经有3人回复
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- BioEPI: 3
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
2楼2009-04-20 09:39:00
3楼2009-04-20 11:04:04
xiaorong-er
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1324.1
- 红花: 1
- 帖子: 546
- 在线: 82.5小时
- 虫号: 234839
- 注册: 2006-03-31
- 专业: 食品科学基础
4楼2009-04-20 15:36:48
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- BioEPI: 3
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
5楼2009-04-20 15:48:32
★
xiaorong-er(金币+1,VIP+0): 4-21 08:21
xiaorong-er(金币+1,VIP+0): 4-21 08:21
|
你把用非特异性引物扩出的条带大小在你估计的范围内的送去测序，序列出来后Blast看一下是否确实是你的目的基因扩出来的序列，如果是再根据已知序列重新设计引物，此时目的条带200bp就可以了，用新设计的引物进行定量或半定量的实验。 如何知道目的片段的大小，设计兼并性引物（非特异性引物时）你看看在相似基因上从上游引物到下游引物究竟有多少BP就可以粗略估计你的目的片段大小， 相似基因上碱基有差异，但是序列长度不会相差太大。 [ Last edited by gastrodia on 2009-4-20 at 18:36 ] |
6楼2009-04-20 18:34:30
