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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 表达跨膜蛋白的跨膜部分讨论
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mjl3680

木虫 (小有名气)

[交流] 表达跨膜蛋白的跨膜部分讨论

我把跨膜部分和荧光蛋白融合在pet30a质粒中，转到BL21表达，怎么只表达荧光蛋白，下一步该怎么办，用什么载体和细菌比较好呢？
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1楼 2009-04-16 15:42:29
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mjl3680

木虫 (小有名气)
我用的是现成的表达载体，pet30a+ ，在多克隆位点插入跨膜基因和GFP基因，菌种BL21也是常用的大肠杆菌的表达菌株，我也没什么经验，我现在也是遇到问题，前面的基因没表达，但绿色荧光蛋白表达了，搞不懂为什么
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3楼2009-04-17 20:57:11
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luckyyan

新虫 (小有名气)
您好，我也是作膜蛋白的，我是新手。请问您是把GFP之类的荧光蛋白连到ORF之后还是怎么做的呢？您这菌株可以直接表达连到载体上基因吗？请您方便的时候介绍一下！！谢谢！！！
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2楼2009-04-17 20:44:32
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mimisikai

金虫 (小有名气)
检查基因是否正确  是否出现了提前中断
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4楼2009-04-17 21:04:55
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mjl3680

木虫 (小有名气)
如果 提前中断，后面GFP的基因还可以正确表达是什么原因啊
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5楼2009-04-18 16:21:07
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