24小时热门版块排行榜    

查看: 394  |  回复: 4
当前主题已经存档。

mjl3680

木虫 (小有名气)

[交流] 表达跨膜蛋白的跨膜部分讨论

我把跨膜部分和荧光蛋白融合在pet30a质粒中,转到BL21表达,怎么只表达荧光蛋白,下一步该怎么办,用什么载体和细菌比较好呢?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luckyyan

新虫 (小有名气)

您好,我也是作膜蛋白的,我是新手。请问您是把GFP之类的荧光蛋白连到ORF之后还是怎么做的呢?您这菌株可以直接表达连到载体上基因吗?请您方便的时候介绍一下!!谢谢!!!
2楼2009-04-17 20:44:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mjl3680

木虫 (小有名气)

我用的是现成的表达载体,pet30a+ ,在多克隆位点插入跨膜基因和GFP基因,菌种BL21也是常用的大肠杆菌的表达菌株,我也没什么经验,我现在也是遇到问题,前面的基因没表达,但绿色荧光蛋白表达了,搞不懂为什么
3楼2009-04-17 20:57:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mimisikai

金虫 (小有名气)

检查基因是否正确  是否出现了提前中断
4楼2009-04-17 21:04:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mjl3680

木虫 (小有名气)

如果 提前中断,后面GFP的基因还可以正确表达是什么原因啊
5楼2009-04-18 16:21:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mjl3680 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见