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静在咫尺

[交流] 【求助】游离氨基酸的水解方法

急求肉中游离氨基酸的提取方法,进氨基酸自动分析仪用的,注意,是游离氨基酸,不是蛋白质水解的氨基酸,请告诉具体的沉淀方法,进样的稀释倍数,急求!!!!!!!!!!!!!!!!!
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anran3919

新虫 (初入文坛)

FAA 含量测定

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
hawkyin(金币+2,VIP+0):谢谢 1-17 13:34
这个是用高效液相色谱法测定时的处理方法,不知道你能不能用
样品自然解冻后,剔除可见脂肪和筋膜,绞碎,称取5g 左右(精确到0.001g),加入去离子水20ml,在冰浴中用ULTRA TURRAX(IKAT18 basic, German)组织捣碎3次(22000r/min,每次10s,间隔10s),然后加入10% 磺基水杨酸20ml 混合均匀,于4℃下放置17h,中速滤纸过滤后,用4mol/L NaOH调整滤液pH 值至6.0,并定容至50ml,经10kDa 超滤膜超滤除去大分子。超滤液用AccQ•Fluor Reagent Kit
(P/N WAT052880)进行衍生处理后,用HPLC 外标法测定样品中的游离氨基酸含量。H P L C 主要技术参数:AccQ•Tag 柱(Nava-Pak C18, 3.9 × 150mm,Φ 0.4μm),柱温37℃;进样体积10μl;Waters 515 双泵梯度洗脱,洗脱液A 为 AccQ•Tag 洗脱液A 用超纯水11 倍稀释而成,洗脱液B 为60% 色谱纯乙腈;洗脱速度1.0ml/min,洗脱时间50min,Waters 2487 紫外检测器检测。梯度洗脱按如下程序进行:洗脱液B 初始浓度为0%,在0.5min内升至1.0%,接着在16.5min 内升至7.0%,然后4min 升至10.0%,9min 再升至33.0%,然后1min 升至100.0%,保持3min,最后于1min 内降到0%,并维持12min。
4楼2010-01-17 09:57:05
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yongyuan734

木虫 (正式写手)

★ ★
静在咫尺(金币+1):谢谢参与
静在咫尺(金币+1,VIP+0):国标里没有,只有蛋白质水解氨基酸的测定方法 4-17 08:38
好像国标里面有处理方法吧,你去查国标
世间自有公道, 付出终有回报。  说到不如做到,   要做就做最好。
2楼2009-04-16 20:58:13
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lissomchan

木虫 (著名写手)

★ ★ ★
静在咫尺(金币+1):谢谢参与
静在咫尺(金币+1,VIP+0): 4-21 08:17
静在咫尺(金币+1,VIP+0): 6-9 07:40
有这方面的文献报道,用离子交换柱
3楼2009-04-17 19:13:07
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