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【求助】游离氨基酸的水解方法
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| 急求肉中游离氨基酸的提取方法，进氨基酸自动分析仪用的，注意，是游离氨基酸，不是蛋白质水解的氨基酸，请告诉具体的沉淀方法，进样的稀释倍数，急求！！！！！！！！！！！！！！！！！ |
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yongyuan734
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2楼2009-04-16 20:58:13
lissomchan
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3楼2009-04-17 19:13:07
FAA 含量测定
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
hawkyin(金币+2,VIP+0):谢谢 1-17 13:34
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这个是用高效液相色谱法测定时的处理方法，不知道你能不能用 样品自然解冻后，剔除可见脂肪和筋膜，绞碎，称取5g 左右(精确到0.001g)，加入去离子水20ml，在冰浴中用ULTRA TURRAX(IKAT18 basic, German)组织捣碎3次(22000r/min，每次10s，间隔10s)，然后加入10% 磺基水杨酸20ml 混合均匀，于4℃下放置17h，中速滤纸过滤后，用4mol/L NaOH调整滤液pH 值至6.0，并定容至50ml，经10kDa 超滤膜超滤除去大分子。超滤液用AccQ•Fluor Reagent Kit (P/N WAT052880)进行衍生处理后，用HPLC 外标法测定样品中的游离氨基酸含量。H P L C 主要技术参数：AccQ•Tag 柱(Nava-Pak C18, 3.9 × 150mm，Φ 0.4μm)，柱温37℃；进样体积10μl；Waters 515 双泵梯度洗脱，洗脱液A 为 AccQ•Tag 洗脱液A 用超纯水11 倍稀释而成，洗脱液B 为60% 色谱纯乙腈；洗脱速度1.0ml/min，洗脱时间50min，Waters 2487 紫外检测器检测。梯度洗脱按如下程序进行：洗脱液B 初始浓度为0%，在0.5min内升至1.0%，接着在16.5min 内升至7.0%，然后4min 升至10.0%，9min 再升至33.0%，然后1min 升至100.0%，保持3min，最后于1min 内降到0%，并维持12min。 |
4楼2010-01-17 09:57:05
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