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melodyxw

铜虫 (初入文坛)

[交流] 请教一个关于液相双峰的问题

今天用一根新的手性柱来摸一对对映体的分离条件
溶剂是甲醇,流动相为纯甲醇
进消旋体后有三个峰,第一个出现在8min,后面两个靠在一起,在11min,等高,分离度为0.68,而且第一个峰的峰面积与后两个峰的峰面积之和的比大约为1:1,分离结果可以多次重复。
后进单体分析,R体在8min为一个单峰,S体在11min为等高的裂峰。
怀疑是溶解度的问题,所以稀释十倍进样,发现情况依然相同。
怀疑是溶剂的问题,进了一针空白溶剂,结果表示溶剂清洁。
很奇怪,很头疼,不知道还能是什么问题,请各位大侠帮助分析,非常感激!
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melodyxw

铜虫 (初入文坛)

三楼说的甲醇酸度是什么意思啊?
我用色谱级甲醇溶解样品,用100%色谱级甲醇和100%乙醇分别作过流动相
情况是一样的,都裂峰,等高
唯一不同的是甲醇作流动相时的峰更宽,柱效率好像不如乙醇作流动相时好
5楼2009-04-16 09:33:29
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dxyzoe

木虫 (正式写手)

诡异啊,换个新点的柱子或换台仪器试试,还有定量环密封性如何,还有再多稀释一百倍,不过,要是过载的话分离度应该不会这样,帮你顶上去吧
2楼2009-04-15 17:40:59
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yiqy

新虫 (初入文坛)


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教! 4-16 00:09
还有一个肯能性,就是溶剂甲醇的酸度不合适,使峰裂解
3楼2009-04-15 22:44:03
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melodyxw

铜虫 (初入文坛)

太好了,还以为帖子会没有人理
昨天的样品已经稀释过一百倍了,响应值在5以内的时候,还是一样的裂缝,等高,分离度0.68
如果是仪器的问题,或者定量环的问题应该不只是这个峰会裂的吧。
我又试了一个保留稍微强一点的样品,用乙醇来冲,都很正常
这么看来好像只可能是样品的问题了。
但是同样的样品在正相上面测,一点问题也没有,这个柱子是正相和反相都可以用的DAICEIL 的 chiralpak IA柱,把柱子换到正相来分同样的样品就没有裂峰。
依然很困惑,今天用另一个新的IA柱试验一下吧
4楼2009-04-16 09:30:26
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